The perbezaan utama antara kromatografi pertukaran afin dan ion adalah kita boleh menggunakan kromatografi afiniti untuk memisahkan komponen yang dicas atau tidak dicas dalam campuran manakala kita boleh menggunakan kromatografi pertukaran ion untuk memisahkan komponen yang dikenakan dalam campuran.
Chromatography adalah teknik yang boleh kita gunakan untuk memisahkan komponen yang dikehendaki dalam campuran. Terdapat pelbagai jenis seperti kromatografi cecair, kromatografi gas, dan lain-lain. Kromatografi afiniti dan kromatografi pertukaran ion adalah dua subkategori kromatografi cecair. Juga, dalam teknik ini, terdapat dua fasa. Iaitu fasa pegun dan fasa bergerak. Tujuan teknik ini adalah untuk memisahkan komponen, bergantung kepada pengikatan komponen, dalam fasa bergerak ke permukaan fasa pegun.
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Kromatografi Teragih
3. Apakah Kromatografi Exchange Ion?
4. Side by Side Comparison - Affinity vs Ion Exchange Chromatography dalam Borang Tabular
5. Ringkasan
Kromatografi afiniti adalah teknik biokimia yang kita gunakan untuk memisahkan komponen dalam campuran bergantung kepada interaksi antara komponen ini.
Interaksi yang kami gunakan dalam kes ini termasuk perkara berikut:
Dalam teknik ini, kita menggunakan sifat molekul molekul untuk teknik pemisahan ini. Di sini, kami membenarkan sebatian yang dikehendaki untuk berinteraksi dengan fasa pegun melalui ikatan hidrogen, interaksi ionik, jambatan disulfida, interaksi hidrofobik, dan sebagainya. Molekul-molekul yang tidak berinteraksi dengan fasa pegun akan elus terlebih dahulu. Oleh itu, kita boleh memisahkannya dari campuran. Kompaun yang dikehendaki akan tetap dilekatkan pada fasa pegun. Oleh itu, kita boleh melepaskannya menggunakan pelarut eluting dan menjadikannya elus untuk memisahkannya juga.
Rajah 01: Lajur Chromatographic
Kromatografi afinitas berguna dalam pemurnian dan menumpukan bahan daripada campuran menggunakan larutan penampan. Juga, ia membantu dalam mengurangkan bahan-bahan yang tidak diingini dalam campuran. Apabila mempertimbangkan peralatan yang kita gunakan untuk proses ini, kita harus menggunakan lajur yang diisi dengan fasa pegun kita. Kemudian, kita perlu memuat fasa mudah alih yang mengandungi biomolekul yang akan kita jalankan. Seterusnya, biarkan mereka terikat dengan fasa pegun. Selepas itu, dengan menggunakan penampan cuci, kita boleh memisahkan biomolekul bukan sasaran, tetapi molekul sasaran harus mempunyai pertalian yang tinggi untuk fasa pegun untuk berjaya proses pemisahan.
Kromatografi ion adalah sejenis kromatografi cair di mana kita dapat menganalisis bahan-bahan ionik. Selalunya, kami menggunakannya untuk menganalisis anion dan kation anorganik (iaitu anion klorida dan nitrat dan kalium, natrium kation). Walaupun ia kurang biasa, kita boleh menganalisis ion organik juga. Selain itu, kita boleh menggunakan teknik ini untuk pembersihan protein kerana protein dikenakan molekul pada nilai pH tertentu. Di sini, kita menggunakan fasa pegun pepejal yang mana zarah yang dikenakan boleh dilampirkan. Sebagai contoh, kita boleh menggunakan kopolimer polistirena-divinilbenzene resin sebagai sokongan padu.
Rajah 02: Fasa-peringkat Kromatografi Pertukaran Ion
Untuk menerangkannya lagi, fasa pegun mempunyai ion tetap seperti anion sulfat atau kation amina kuartner. Setiap ini harus dikaitkan dengan penolakan (ion dengan caj yang bertentangan), jika kita hendak mengekalkan neutralitas sistem ini. Di sini, jika penentangan adalah kation, maka kita namakan sistem sebagai resin pertukaran kation. Tetapi, jika tegasan itu anion, sistem itu adalah resin pertukaran anion.
Terdapat lima fasa utama dalam proses pertukaran ion;
Kromatografi afiniti adalah teknik biokimia yang kita gunakan untuk memisahkan komponen dalam campuran bergantung kepada interaksi antara komponen ini manakala kromatografi ion adalah suatu bentuk kromatografi cair di mana kita boleh menganalisis bahan ionik. Oleh itu, perbezaan utama antara kromatografi pertukaran afin dan ion adalah kita boleh menggunakan kromatografi pertukaran ion hanya untuk pemisahan bahan ionik manakala kromatografi afiniti mampu memisahkan kedua-dua zarah yang dikenakan dan tidak beroperasi. Apabila mempertimbangkan prinsip kerja, perbezaan antara kromatografi pertukaran afin dan ion adalah kromatografi afiniti yang berlaku kerana fakta bahawa molekul sasaran mempunyai pertalian yang tinggi untuk fasa pegun. Walau bagaimanapun, bagi kromatografi pertukaran ion, molekul sasaran mempunyai caj yang bertentangan dengan permukaan fasa pegun.
Infographic di bawah menunjukkan perbezaan antara kromatografi pertukaran afin dan ion sebagai perbandingan sampingan.
Ringkasnya, kromatografi pertukaran afin dan ion adalah dua bentuk teknik kromatografi cair. Perbezaan utama antara afin dan kromatografi pertukaran ion ialah kita boleh menggunakan kromatografi afiniti untuk memisahkan komponen yang dicas atau tidak dicas dalam campuran manakala kita boleh menggunakan kromatografi pertukaran ion untuk memisahkan komponen yang dikenakan dalam campuran.
1. "Kromatografi Teragih." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 5 Okt 2018. Boleh didapati di sini
2. Libretexts. "Kromatografi Ion-Pertukaran." Chemistry FreeTexts, Libretexts, 29 Disember 2016. Boleh didapati di sini
1. "resin nikel" Oleh Pdcook - Kerja sendiri, (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons
2. "Iex" Oleh Daliak (Domain Awam) melalui Wikimedia Commons