Perbezaan Antara Elektroforesis dan Elektroforesis Gel Kapilari

Perbezaan Utama - Electrohoresis Elektroforesis Gel Kapilari
 

Elektroforesis adalah satu teknik yang digunakan untuk memisahkan biomolekul berdasarkan caj zarah, saiz zarah, dan bentuk zarah. Penghijrahan molekul, yang dikenali sebagai mobiliti electrophoretic, bergantung kepada jenis polimer / gel yang digunakan, saiz liangnya, voltan yang disediakan, masa berjalan dan permukaan ke nisbah isipadu. Terdapat pelbagai jenis teknik elektroforesis berdasarkan jenis biomolekul yang digunakan. Jenis elektroforesis pertama yang dicipta ialah elektroforesis kertas di mana kertas nitrocellulosa digunakan sebagai medium untuk pemisahan biomolekul. Prinsip elektroforesis gel di mana gel berukuran berlainan yang digunakan untuk memisahkan biomolekul, dicipta kemudian. Teknik elektroforesis gel diubahsuai untuk meningkatkan ketepatan teknik, dan satu pengubahsuaian adalah elektroforesis kapilari. Perbezaan utama antara electrophoresis kapilari dan elektroforesis gel adalah bahawa elektroforesis gel dilakukan dalam satah menegak atau mendatar menggunakan gel polimer saiz piawai standard manakala elektroforesis kapilari dilakukan dalam tiub kapilari dengan cecair polimer atau gel.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Gel Elektroforesis
3. Apakah Elektroforesis Kapsul
4. Persamaan Antara Elektroforesis dan Elektroforesis Gel
5. Perbandingan Sampingan Sampingan - Electrophoresis Gel Elektroforesis Capillaryis dalam Borang Tabular
6. Ringkasan

Apakah Gel Elektroforesis??

Elektroforesis gel adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan terutamanya asid nukleik, protein atau asid amino berdasarkan caj, saiz, dan bentuknya. Teknik ini menggunakan gel fizikal, iaitu bahan polimer, sebagai medium pemisahan. Gel yang paling biasa digunakan ialah Agarose (untuk pemisahan asid nukleik) dan Polyacrylamide (untuk pemisahan protein). Alat electrophoretic gel mengandungi dulang pemutus gel untuk mempersiapkan gel, sikat sisipan untuk menyediakan telaga, tangki penampan, elektrod - positif (anoda) dan negatif (katod) dan unit bekalan voltan. Molekul seperti DNA atau RNA, yang dikenakan secara negatif, bergerak dari katod ke anod dan molekul yang bergerak secara positif sebaliknya. Penyediaan gel dilakukan mengikut keperluan. Jika resolusi tinggi atau pemisahan molekul diperlukan, gel kepekatan yang tinggi dengan saiz liang yang lebih rendah perlu disediakan. Molekul yang dipisahkan pada matriks gel diperhatikan selepas teknik pewarnaan. Molekul yang dipisahkan muncul sebagai band di gel matriks.

Rajah 01: Elektroforesis Gel

Elektroforesis Gel digunakan dalam diagnostik molekul seperti cap jari DNA untuk menentukan kehadiran fragmen DNA / RNA tertentu atau protein. Elektroforesis gel juga menentukan kesucian sampel biomolekul yang diekstrak. Elektroforesis gel dilakukan sebagai langkah awal untuk masuk dan hibridisasi dan sebagai analisis pengesahan selepas penjujukan.

Apakah Elektroforesis Kapsul?

Elektroforesis kapiler adalah pengubahsuaian elektroforesis gel yang menggunakan prinsip pemisahan yang sama berdasarkan caj, saiz molekul, tetapi dilakukan dalam tiub kapilari dengan sama ada bahan gel atau polimer cecair. Kapilari disediakan bersatu silika, dan setiap tiub kapilari mempunyai diameter dalaman 50-100μm dan panjangnya 25-100cm. Sampel disuntik ke dalam tiub kapilari yang mengandungi bahan polimer dan dipisahkan dengan lebih cepat daripada elektroforesis gel konvensional. Sistem kapilari dilindungi dengan baik di dalam jaket penebat yang melindungi sampel dari sebarang pencemaran. Kapilari boleh diisi dengan polimer cecair seperti hydroxyethyl cellulose atau gel resolusi tinggi seperti polyacrylamide. Elektroforesis kapilari memberikan resolusi yang lebih besar; maka pemisahan lebih tepat. Elektroforesis kapilari menggunakan sistem pengesan automatik melalui analisis spektrofotometri. Ini disebabkan oleh kawasan permukaan yang lebih tinggi kepada nisbah isipadu.

Rajah 02: Elektroforesis kapilari

Elektroforesis kapilari digunakan dalam keadaan seperti di forensik di mana ketepatan yang lebih tinggi diperlukan dan tidak biasa digunakan kerana teknik mahal.

Apakah Kesamaan Antara Elektroforesis dan Elektroforesis Gel Kapilari?

• Pemisahan molekul dalam kedua-dua teknik adalah berdasarkan caj dan saiz molekul.
• Kedua-dua teknik ini boleh digunakan untuk memisahkan kedua-dua asid nukleik dan protein.
• Jumlah sampel kedua-dua teknik adalah sama.
• Kedua-dua teknik menggunakan penampan untuk memisahkan pemisahan.

Apakah Perbezaan Antara Elektroforesis dan Elektroforesis Gel Kapilari?

Electrophoresis Electrohydrous Capilari vs Gel Elektroforesis
Elektroforesis kapilari adalah teknik yang memisahkan biomolekul pada tiub kapilari menggunakan medium polimer cecair atau gel.	Elektroforesis gel adalah teknik yang memisahkan biomolekul pada satah menegak atau mendatar menggunakan medium gel polimer.
Pemisahan
Dalam elektroforesis kapilari, pemisahan dilakukan di dalam tiub kapilari.	Dalam elektroforesis gel, pemisahan dilakukan pada satah menegak atau mendatar.
Sederhana Pemisahan
Polimer cecair seperti hydroxyethylcellulose digunakan dalam elektroforesis kapilari.	Gel, sama ada agarose atau polyacrylamide, digunakan sebagai medium dalam elektroforesis gel.
Cross Linkage
Resolusi tinggi boleh didapati daripada elektroforesis kapilari.	Resolusi rendah elektroforesis gel.
Kawasan Permukaan kepada Nisbah Jilid
Nisbah permukaan ke atas adalah tinggi dalam elektroforesis kapilari.	Nisbah permukaan ke bawah adalah rendah dalam elektroforesis gel.
Teknik Pengesanan
Pengesanan dilakukan melalui pengesan automatik spektrofotometri dalam elektroforesis kapilari.	Mengotorkan dan memerhatikan melalui transilluminator UV dilakukan sebagai teknik pengesanan elektroforesis gel.

Ringkasan - Elektroforesis Gel Elektroforesis Capilari

Diagnostik molekul memainkan peranan penting dalam dunia saintifik. Pengenalpastian dan pembersihan DNA, RNA, dan Protein adalah langkah kritikal dalam prosedur diagnostik. Elektroforesis adalah teknik yang memisahkan dan mengenal pasti biomolekul dalam kedua-dua elektroforesis gel dan electrophoresis gel kapilari yang lebih maju. Elektroforesis gel dilakukan dalam satah menegak atau mendatar menggunakan gel polimer saiz piawai standard manakala elektroforesis kapilari dilakukan dalam tiub kapilari dengan cecair polimer atau gel. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis kapilari dan elektroforesis gel. Setelah selesai teknik elektroforesis, biomolekul akan diproses selanjutnya untuk mendapatkan maklumat peringkat tinggi menerusi hibridisasi atau melalui teknik seperti cap jari.

Muat turun Versi PDF Electrophoresis Electrophoresis Capillary vs Gel

Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti nota kutipan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Gel Elektroforesis dan Elektroforesis Kapilari.

Rujukan:

1. Durney, Brandon C., et al. "Elektroforesis kapilari digunakan untuk DNA: menentukan dan memanfaatkan urutan dan struktur untuk memajukan bioanalisis (2009-2014)." Kimia Analitikal dan Bioanalytik, Springer Berlin Heidelberg, 2015, Boleh didapati di sini. Diakses pada 28 Ogos 2017.
2. "Elektroforesis." Universiti Leicester, 8 Jan 2009, Boleh didapati di sini. Diakses pada 28 Ogos 2017.
3. "Gel elektroforesis." Khan Academy, terdapat di sini. Diakses pada 28 Ogos 2017.

Image Courtesy:

1. "Elektroforesis gel DNA Agarose" oleh Sekolah Sumber Asli dari Ann Arbor - makmal DNA (CC BY 2.0) melalui Wikimedia Commons
2. "Alat Elektroforesis Gel Kapilari" oleh Chem4066sp13 - Kerja sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons