The perbezaan utama antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif ELISA yang kompetitif menggunakan antigen perencangan manakala ELISA tidak kompetitif tidak menggunakan antigen perencatan untuk ujian.
Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) adalah sejenis imunologi yang mengesan pelbagai sasaran seperti antibodi, antigen, protein, dan glikoprotein. Ia adalah cara yang cepat dan mudah untuk dilakukan. Oleh itu, ia lebih kerap digunakan untuk tujuan penyelidikan dan diagnostik. ELISA melibatkan penggunaan enzim dan pengikatan antibodi dan antigen spesifik. Berdasarkan bagaimana tindak balas terjadi, terdapat empat jenis ELISA: ELISA langsung, ELISA tidak langsung, ELISA sandwich, dan penghambatan ELISA. ELISA langsung, tidak langsung dan sandwic adalah jenis ELISA yang tidak kompetitif manakala penghambatan ELISA adalah sejenis ELISA yang lengkap. Matlamat utama artikel ini adalah untuk membincangkan perbezaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah ELISA Kompetitif
3. Apakah ELISA Noncompetitive
4. Persamaan Antara ELISA Kompetitif dan Tidak Kompetitif
5. Perbandingan Side by Side - Kompetitif vs ELISA Tidak Kompetitif dalam Borang Tabular
6. Ringkasan
ELISA yang kompetitif mengukur kepekatan antigen dalam sampel melalui pengesanan gangguan isyarat. Di sini, ujian ini menggunakan antigen perencat. Oleh itu, ia adalah jenis penghambatan ELISA. Semasa prosedur ini, antigen yang hadir dalam sampel bersaing dengan antigen rujukan yang dipilih untuk mengikat kepada jumlah tertentu antibodi berlabel. Tambahan pula, prosedur ini bermula dengan inkubasi sampel, dengan jumlah lebihan antibodi berlabel. Selain itu, antigen rujukan mestilah pra-bersalut pada plat pancang yang pelbagai. Kemudian campuran sampel perlu ditambah ke plat assay yang mengandungi antigen rujukan. Antibodi bebas akan mengikat antigen rujukan bergantung kepada jumlah antigen dalam sampel. Oleh itu, jika lebih banyak sampel antigen hadir, antigen rujukan yang kurang akan dikesan. Oleh itu, ia mewujudkan isyarat yang lebih lemah.
Rajah 01: ELISA
Sebaliknya, apabila sampel mengandungi jumlah antigen yang kurang, lebih banyak antigen rujukan akan menduduki antibodi dan memberi isyarat yang kuat. Oleh kerana ELISA yang kompetitif memberikan isyarat yang lebih kuat apabila sampel mengandungi jumlah antigen yang rendah, ELISA yang kompetitif adalah ujian yang sangat sensitif, walaupun untuk sampel dengan sebilangan kecil antigen.
Dalam beberapa kit ELISA yang kompetitif, antigen berlabel digunakan dan bukan antibodi berlabel. Di sini, antigen berlabel dan antigen sampel akan bersaing untuk mengikat antibodi utama. Begitu juga, apabila jumlah antigen dalam sampel adalah rendah, jumlah antigen berlabel yang mengikat antibodi akan lebih tinggi dan menghasilkan isyarat yang lebih kuat.
Antara empat jenis ELISA, tiga jenis adalah ELISA yang tidak kompetitif. Mereka adalah langsung ELISA, ELISA tidak langsung, dan ELISA sandwic. Ketiga format ini bekerja di bawah prinsip ELISA dengan sedikit perbezaan dalam metodologi mereka.
ELISA langsung menggunakan enzim yang dilabel antibodi utama. Oleh itu, ia tidak memerlukan antibodi sekunder. Oleh itu, ELISA terus lebih cepat daripada jenis ELISA yang lain. Antibodi utama akan terus mengikat kepada antigen sasaran yang tidak bergerak yang terdapat di dalam plat. Oleh itu, reaksi enzim-substrat akan berlaku, menghasilkan isyarat yang kelihatan.
Rajah 02: ELISA Sandwich
Tidak seperti ELISA langsung, ELISA tidak langsung menggunakan antibodi utama yang tidak dilabel dan enzim berlabel antibodi sekunder. Setelah antibodi utama mengikat antigen yang tidak bergerak, antibodi sekunder mengikat ke antibodi utama. Enzim dalam antibodi sekunder akan bertindak balas dengan antigen dan menghasilkan isyarat yang kelihatan. ELISA Sandwich berbeza dengan ELISA langsung dan tidak langsung. Di sini, antibodi itu tidak bergerak ke dinding plat assay.
ELISA yang kompetitif adalah sejenis ELISA yang bergantung pada penyelesaian antara antigen analyte dan antigen berlabel untuk jumlah tertentu antibodi tertentu. Sebaliknya, tiada pertandingan sedemikian wujud antara antigen faedah dan antigen rujukan dalam ELISA yang tidak kompetitif. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif. Begitu juga, ELISA yang kompetitif adalah penghambatan ELISA sementara ELISA yang tidak kompetitif bukanlah penghambatan ELISA. Oleh itu, ini juga merupakan perbezaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.
Selain itu, ELISA yang kompetitif lebih sesuai untuk mengukur jumlah antigen yang rendah. Ia adalah kaedah sensitif. Sebaliknya, ELISA yang tidak kompetitif tidak bergantung kepada bilangan antigen yang hadir dalam sampel. Oleh itu, ini juga merupakan perbezaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.
Di bawah infographic menerangkan perbezaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif secara relatif.
ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif adalah dua jenis utama ELISA atau ujian imunosorben berkaitan enzim. Dalam meringkaskan perbezaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif, ELISA yang berdaya saing bergantung kepada persaingan antara antigen faedah dan antigen rujukan terhadap jumlah antibodi yang terhad. Oleh itu, ELISA yang kompetitif juga dinamakan sebagai penghambatan ELISA. Sebaliknya, ELISA tidak kompetitif tidak bergantung pada persaingan antara antigen sasaran dan antigen rujukan. Ia menggunakan lebihan antibodi khusus berlabel ke arah analit minat. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif. ELISA langsung, ELISA tidak langsung, dan ELISA sandwic adalah tiga jenis ELISA yang tidak kompetitif.
1. Bio-Rad. "Jenis ELISA | Bio-Rad. " Bio, terdapat di sini.
2. "Empat Jenis ELISA." Cusabio Life Science - Rakan Sains Biologi anda, Boleh didapati di sini.
"Elisa tipus" Oleh Carolfv333 - Kerja sendiri (CC BY-SA 4.0) Wikimedia Commons.
"Sandwich Immunoassay, ELISA" Oleh NickCT - Kerja sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons