Perbezaan antara Immunofluorescence langsung dan tidak langsung

The perbezaan utama antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung adalah bahawa Immunofluorescence langsung menggunakan antibodi tunggal yang berfungsi menentang sasaran minat manakala immunofluorescence tidak langsung menggunakan dua antibodi untuk melabelkan sasaran kepentingan.

Immunofluorescence atau pencitraan sel adalah teknik yang digunakan untuk melabel antigen sasaran tertentu dengan fluorophore. Di sini, fluorophore adalah sebatian kimia pendarfluor yang dapat memancarkan cahaya semula dengan pengujaan cahaya. Apabila fluorophore mengikat dengan antigen sasaran, ia membolehkan pengesanan molekul sasaran dalam sampel. Untuk menerangkannya lebih lanjut, apabila antigen mengikat dengan antibodi tertentu, ia boleh dikaitkan dengan fluorophores. Oleh itu, mudah untuk mengesan kehadiran antigen sasaran dalam sampel apabila memerhatikan di bawah mikroskop pendarfluor.

Selain itu, terdapat dua jenis imunofluoresensi; imunofluoresensi langsung dan tidak langsung. Perbezaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung terutamanya terletak pada bilangan antibodi yang digunakan dan konjugasi fluorophore. Iaitu, secara langsung imunofluoresensi, fluorophore secara langsung menjejaskan antibodi utama manakala dalam immunofluorescence tidak langsung, konjugat fluorophore dengan antibodi sekunder.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Immunofluorescence Langsung
3. Apakah Immunofluorescence tidak langsung
4. Kesamaan Antara Immunofluorescence Langsung dan Tidak Langsung
5. Side by Side Comparison - Langsung vs Immunofluorescence Tidak Langsung dalam Borang Tabular
6. Ringkasan

Apakah Immunofluorescence yang Langsung?

Immunofluorescence menggunakan antibodi untuk mengesan antigen sasaran tertentu. Immunofluorescence langsung adalah salah satu daripada dua jenis immunofluorescence. Dalam imunofluoresensi langsung, antibodi tunggal (antibodi utama) melibatkan dan fluorophore secara langsung conjugates dengan antibodi utama. Apabila mengikat antibodi dengan antigen sasaran, fluorophore memancarkan pendarfluor yang dapat dikesan oleh mikroskop pendarfluor.

Rajah 01: Immunofluorescence langsung

Walau bagaimanapun, imunofluoresensi langsung adalah kaedah yang mahal kerana antibodi konjugasi utama adalah mahal berbanding dengan antibodi sekunder. Walau bagaimanapun, ia tidak melibatkan langkah tambahan, teknik yang lebih pendek. Tambahan pula, pengikatan yang tidak spesifik dikurangkan dalam imunofluoresensi langsung. Oleh itu, spesies balas silang adalah rendah. Tetapi dalam pengesanan, kepekaan imunofluoresensi langsung adalah lemah berbanding dengan imunofluoresen tidak langsung .

Apakah Immunofluorescence Tidak Langsung??

Immunofluorescence tidak langsung adalah jenis kedua immunofluorescence yang melibatkan dua jenis antibodi seperti antibodi primer dan sekunder dalam label antigen sasaran. Dalam kaedah ini, fluorophore conjugates dengan antibodi sekunder. Oleh itu, teknik ini melibatkan langkah tambahan.

Rajah 02: Immunofluorescence

Walau bagaimanapun, kepekaan tinggi dalam kaedah ini kerana beberapa fluorofores boleh dirujuk kepada antibodi sekunder dan ia menjadikan pengesanan lebih mudah. Tambahan pula, immunofluorescence tidak langsung adalah lebih murah kerana fakta bahawa konjugasi antibodi menengah adalah lebih murah dan lebih mudah. Berbanding dengan immunofluorescence langsung, spektrum silang spesies tinggi dalam kaedah tidak langsung.

Apakah Kesamaan Antara Immunofluorescence Langsung dan Tidak Langsung??

• Mereka adalah dua jenis teknik immunofluorescence.
• Antibodi utama dan fluorofore melibatkan kedua-dua kaedah.
• Juga, reaksi antigen-antibodi berlaku dalam kedua-dua kaedah.
• Tambahan pula, imunofluoresensi langsung dan tidak langsung menggunakan mikroskop pendarfluor untuk mengesan antigen.

Apakah Perbezaan Antara Immunofluorescence Langsung dan Tidak Langsung??

Immunofluorescence boleh langsung atau tidak langsung berdasarkan konjugasi fluorophore dengan antibodi yang digunakan. Dalam imunofluoresensi langsung, fluorophore conjugates dengan antibodi utama, yang merupakan antibodi tunggal yang melibatkan dalam teknik ini. Berbeza dengan itu, dalam immunofluorescence tidak langsung, fluorophore conjugates dengan antibodi sekunder, yang merupakan salah satu daripada dua jenis antibodi yang melibatkan dalam teknik ini. Oleh itu, perbezaan utama antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung adalah jenis antibodi yang konjugasi dengan fluorophore.

Infographic berikut memberikan perbandingan sampingan perbezaan antara imunofluoresensi langsung dan tidak langsung.

Ringkasan - Langsung vs Immunofluorescence tidak langsung

Immunofluorescence adalah teknik yang digunakan untuk mengesan kehadiran antigen tertentu dalam sampel. Teknik ini menggunakan antibodi spesifik. Oleh itu, dalam antibodi ini, konjugasi dengan fluorophores mengesan mereka menggunakan mikroskop fluoresen. Selain itu, terdapat dua jenis immunofluorescence iaitu immunofluorescence langsung dan tidak langsung. Immunofluorescence langsung melibatkan antibodi tunggal dan fluorophore langsung dirujuk kepada antibodi ini. Immunofluorescence tidak langsung melibatkan dua antibodi; primer dan sekunder dan fluorofore konjugasi kepada antibodi sekunder. Oleh kerana beberapa antibodi menengah boleh mengikat dengan antibodi utama dan beberapa fluorophores boleh bercanggah dengan antibodi menengah, immunofluorescence tidak langsung adalah kaedah yang lebih sensitif daripada kaedah langsung. Selain itu, kaedah tidak langsung adalah lebih murah daripada kaedah langsung. Oleh itu, ini adalah perbezaan antara immunofluorescence langsung dan tidak langsung.

Rujukan:

1. "Immunofluorescence." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 19 Ogos 2018. Boleh didapati di sini 

Image Courtesy:

1. "HSP IF IgA" Oleh Emmanuelm di en.wikipedia, (CC BY 3.0) melalui Wikimedia Commons
2. "Immunofluorescence" Oleh Westhayl618 - Kerja sendiri, (CC BY-SA 4.0) melalui Wikimedia Commons