Electrohoresis vs Electroosmosis
Kaedah pemisahan fizikal seperti penapisan, penyulingan, kromatografi lajur bukanlah kaedah mudah apabila datang kepada pemisahan beberapa molekul. Elektroforesis dan elektro-osmosis adalah dua teknik pemisahan lain yang boleh digunakan untuk memisahkan zarah yang dikenakan.
Apa itu Elektroforesis?
Elektroforesis adalah teknik memisahkan molekul berdasarkan ukurannya. Asas untuk pemisahan ini adalah pertuduhan molekul dan keupayaannya untuk bergerak di medan elektrik. Ini adalah teknik yang paling biasa dan utama dalam biologi molekular untuk memisahkan molekul, terutamanya DNA dan protein. Ini kebanyakannya digunakan kerana ia agak mudah dan murah. Alat untuk elektroforesis boleh sedikit rumit, dan penyediaannya memerlukan sedikit masa. Tetapi kita boleh dengan mudah membuat alat elektroforesis dari perkara-perkara yang kita ada di makmal. Teknik elektroforesis boleh berbeza bergantung kepada tujuan kami. Kita boleh menggunakan elektroforesis satu dimensi untuk pemisahan DNA atau protein. Elektroforesis dua dimensi digunakan apabila sampel yang lebih diselesaikan diperlukan (seperti dalam kes percetakan jari). Gel digunakan sebagai medium sokongan untuk memisahkan molekul. Gel ini boleh disediakan sebagai kepingan rata atau dalam tiub. Asas prosedur ini adalah untuk memisahkan molekul bergantung kepada kadar pergerakan mereka melalui gel apabila medan elektrik dibekalkan. Molekul yang dikenakan negatif seperti DNA cenderung untuk bergerak ke arah tiang positif dalam medan elektrik ini manakala molekul bermuatan positif cenderung untuk bergerak ke kutub negatif. Dua jenis gel digunakan dalam elektroforesis sebagai agarose dan polyacrylamide. Kedua-dua ini mempunyai kuasa menyelesaikan yang berbeza. Gel bertindak sebagai penapis untuk menapis pelbagai saiz molekul. Caj elektrostatik yang ditetapkan dalam aksi gel sebagai daya.
Pemisahan bergantung kepada pergerakan ion.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = daya yang bertindak pada zarah
f = pekali geseran
V = purata halaju bermigrasi
Z = caj zarah berhijrah
e = caj asas
E = kekuatan medan elektrik
Keadaan yang perlu untuk elektroforesis adalah agak mudah. Apabila membuat gel dan menjalankan sampel, penampan digunakan. Penanda dan pewarna digunakan untuk tujuan visualisasi.
Apakah elektro-osmosis?
Ini adalah proses memindahkan cecair melalui bahan menggunakan medan elektrik yang digunakan. Pergerakan ini boleh melalui bahan berliang, di sepanjang kapilari, membran dll. Ini boleh digunakan sebagai teknik pemisahan (terutama elektro-osmosis kapilari). Halaju cecair adalah linear berkadaran dengan medan elektrik yang digunakan. Ia juga bergantung kepada bahan yang digunakan untuk membina saluran dan penyelesaian yang digunakan. Dalam antara muka, penyelesaian dan bahan telah memperolehi caj yang bertentangan dan, ini dikenali sebagai lapisan double elektrik. Apabila medan elektrik diterapkan pada larutan, lapisan ganda elektrik bergerak oleh daya Coulomb yang dihasilkan. Ini dikenali sebagai aliran elektro-osmotik.
Apakah perbezaan antara Electrophoresis dan Electro-osmosis? • Dalam elektroforesis, zarah pepejal (makromolekul seperti asid nukleik atau protein) dipindahkan menggunakan medan elektrik. Tetapi dalam elektro-osmosis cecair bergerak. • Dalam elektroforesis, bahan pepejal sokongan adalah gel. Tetapi elektro-osmosis ia boleh menjadi gel, membran, kapilari, dan sebagainya. |