Perbezaan Gel Elektroforesis dan SDS Page

Perbezaan Utama - Electrophoresis Gel vs SDS Page
 

Elektroforesis gel adalah teknik yang memisahkan makromolekul dalam medan elektrik. Ini adalah kaedah umum dalam biologi molekular untuk memisahkan DNA, RNA dan protein daripada campuran mengikut saiz molekul mereka. SDS Page adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein daripada campuran protein berdasarkan saiznya. Elektroforesis Gel adalah istilah yang digunakan untuk merujuk kepada teknik biasa yang digunakan untuk DNA, RNA, dan pemisahan protein sementara SDS Page adalah satu jenis elektroforesis gel. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel dan SDS Page.

KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Gel Elektroforesis
3. Apakah halaman SDS
4. Side by Side Perbandingan - Gel Electrophoresis vs SDS Page
5. Ringkasan

Apakah Gel Elektroforesis??

Elektroforesis gel adalah teknik umum yang digunakan dalam makmal untuk memisahkan molekul yang dikenakan seperti DNA, RNA, protein, dan lain-lain dari campuran mereka. Gel digunakan dalam elektroforesis gel. Ia berfungsi sebagai ayakan molekul. Terdapat dua jenis gel yang digunakan dalam elektroforesis gel iaitu agarose dan polyacrylamide. Pemilihan gel dan penyediaan gel adalah faktor penting yang perlu dipertimbangkan dalam elektroforesis gel kerana saiz liang gel perlu dimatikan dengan teliti untuk pemisahan molekul yang baik melalui elektroforesis gel. Elektroforesis Gel mempunyai medan elektrik yang disambungkan ke dua hujung gel. Satu hujung gel menunjukkan caj positif manakala hujung yang lain dikenakan caj negatif.

DNA dan RNA adalah molekul bermuatan negatif. Sebaik sahaja ia dimuatkan ke dalam gel dari ujung negatif gel dan diterapkan ke medan elektrik, mereka berhijrah melalui liang gel ke arah ujung gel yang positif. Kelajuan penghijrahan bergantung pada caj dan saiz molekul. Molekul yang lebih kecil mudah berhijrah melalui liang gel daripada molekul yang lebih besar. Oleh itu, molekul-molekul yang lebih kecil bergerak jarak jauh melalui gel dan molekul-molekul yang lebih besar bergerak jarak dekat. Untuk memerhatikan perjalanan molekul pada gel, jenis pewarna khas digunakan. Medan elektrik digunakan untuk tempoh masa tertentu dan berhenti untuk menghalang kehilangan molekul dan untuk mengekalkan molekul pada kedudukan mereka. Band yang berbeza boleh diperhatikan dalam gel. Band ini mewakili molekul saiz yang berbeza. Oleh itu, elektroforesis gel berguna untuk membezakan molekul mengikut saiznya.

Elektroforesis Gel dimasukkan ke dalam pelbagai teknik sebagai teknik persediaan dalam biologi molekular seperti PCR, RFLP, pengklonan, penjujukan DNA, pemutihan selatan, pemetaan genom, dan sebagainya..

Rajah 01: Elektroforesis Gel Agarose

Apakah halaman SDS?

Elektroforesis gel polyacrylamide natrium dodecil sulfat (SDS Page) adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein. Apabila elektroforesis gel digunakan untuk memisahkan protein, rawatan khas diperlukan kerana protein tidak dicaj secara negatif seperti DNA dan RNA dan tidak berhijrah ke arah akhir positif atau hujung negatif. Oleh itu, protein adalah denatured dan disalut dengan cas negatif sebelum elektroforesis gel. Ia dilakukan menggunakan detergen yang dipanggil natrium dodecyl sulfate (SDS). Elektroforesis gel yang menggunakan SDS dan gel polyacrylamide untuk medium sokongan dikenali sebagai SDS Page. Teknik ini biasanya digunakan dalam biokimia, genetik, forensik dan biologi molekul.

Semasa SDS Page, protein dicampur dengan SDS. SDS melancarkan protein ke dalam bentuk linear dan memintal mereka dengan caj negatif berkadar dengan jisim molekul mereka. Oleh kerana caj negatif, molekul protein berhijrah ke arah akhir pengisian positif gel dan memisahkan mengikut massa molekulnya. Dalam SDS Page, polyacrylamide digunakan sebagai sokongan pepejal untuk gel. Pemisahan sebenar protein bergantung kepada sifat-sifat gel tersebut. Oleh itu, penyediaan gel polyacrylamide perlu dilakukan dengan teliti dan betul kepekatan polyacrylamide harus digunakan. Gel polyacrylamide menunjukkan resolusi tinggi daripada gel agarose. Oleh itu, SDS Page dianggap sebagai teknik resolusi tinggi untuk pemisahan protein.

SDS Page adalah sejenis elektroforesis gel denatur. Ia mempunyai batasan utama dalam analisis protein. Oleh kerana SDS denatur protein sebelum pemisahan, ia tidak membenarkan pengesanan aktiviti enzimatik, interaksi mengikat protein, cofactor protein, dan sebagainya..

Rajah 02: halaman SDS

Apakah perbezaan antara Gel Elektroforesis dan SDS Page?

Gel Elektroforesis vs SDS Page
Gel elektroforesis adalah kaedah yang dilakukan untuk memisahkan makromolekul dengan menggunakan medan elektrik.	SDS Page adalah teknik elektroforesis gel resolusi tinggi yang digunakan untuk memisahkan protein berdasarkan massa mereka.
Run Gel
Ia boleh dilakukan secara mendatar atau menegak.	Halaman SDS sentiasa berjalan secara menegak.
Asas untuk Pemisahan
Pemisahan berlaku mengikut caj dan saiz.	Pemisahan protein berlaku mengikut jisim dan caj.
Resolusi
Elektroforesis gel agarose mempunyai resolusi rendah dan elektroforesis gel polyacrylamide mempunyai resolusi yang lebih tinggi	SDS Page mempunyai resolusi yang lebih baik.
Denaturation
Elektroforesis gel merangkumi kedua-dua teknik penapisan dan bukan penentu.	SDS Halaman denatur protein sebelum pemisahan.

Ringkasan - Gel Electrophoresis vs SDS Page

Elektroforesis Gel adalah teknik umum yang digunakan untuk pemisahan dan analisis DNA, RNA dan protein berdasarkan ukuran dan caj mereka. Terdapat dua jenis elektroforesis gel utama iaitu elektroforesis gel agarose dan elektroforesis gel polyacrylamide. Gel agarose digunakan terutamanya untuk pemisahan asid nukleik; apabila resolusi yang lebih tinggi diperlukan, gel polyacrylamide digunakan. SDS Page adalah sejenis elektroforesis gel yang biasa digunakan untuk memisahkan campuran kompleks protein. Ia dianggap sebagai teknik pemisahan protein resolusi tinggi. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel dan SDS Page.

Rujukan:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig, dan David H. Petering. "SDS-PAGE asli: Resolusi Tinggi Pemisahan Elektroforetik Protein Dengan Pengekalan Hak Asasi Native termasuk Ion Metal Terikat. www.ncbi.nlm.nih.gov. N.p., Mei 2014. Web. 7 Apr. 2017
2. Stellwagen, Nancy C. "Elektroforesis DNA dalam gel agarose, gel polyacrylamide dan penyelesaian bebas." Elektroforesis. Perpustakaan Perubatan Negara A.S., Jun 2009. Web. 07 Apr. 2017

Image Courtesy:
1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons
2. "Elektroforesis Gel Agarose DNA" oleh Sekolah Sumber Asli dari Ann Arbor - makmal DNA (CC BY 2.0) melalui Wikimedia Commons