Noda Gram adalah teknik pewarnaan yang dilakukan untuk membezakan bakteria menjadi dua kumpulan mengikut ketebalan lapisan peptidoglycan di dinding sel mereka. Budaya adalah satu kaedah untuk mengembangkan dan mengekalkan mikroorganisma di bawah keadaan makmal untuk analisis yang berbeza. Perbezaan utama antara gred noda dan budaya adalah fungsi mereka; gram menyembuhkan teknik pewarnaan bakteria di mana budaya adalah kaedah pertumbuhan dan penyelenggaraan mikroorganisma.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Gram Stain
3. Apakah Budaya
4. Side by Side Comparison - Gram Stain vs Culture
5. Ringkasan
Gram stain adalah teknik pewarnaan pembezaan penting yang digunakan untuk pengenalan bakteria dalam Mikrobiologi. Teknik ini diperkenalkan oleh bakteria Denmark Hans Christian Gram pada tahun 1884. Gram pewarnaan mengklasifikasikan bakteria menjadi dua kumpulan utama: gram positif dan gram negatif; ini sangat penting dalam klasifikasi bakteria dan pengenalan. Pewarnaan Gram dilakukan sebagai langkah awal untuk pencirian bakteria.
Bakteria dikumpulkan berdasarkan perbezaan dalam dinding sel mereka. Bakteria gram positif mengandungi lapisan peptidoglycan tebal di dinding sel mereka manakala bakteria Gram negatif mengandungi lapisan peptidoglycan nipis di dinding sel seperti ditunjukkan dalam Rajah 01. Hasil pewarnaan gram akan berdasarkan perbezaan ketebalan lapisan peptidoglycan dinding sel.
Rajah 1: Bakteria Gram positif dan bakteria Gram negatif
Pewarnaan gram dilakukan menggunakan empat reagen yang berbeza iaitu; noda primer, mordant, decolorizing agent dan counter counter. Violet kristal dan safranin berfungsi sebagai noda utama dan counter, masing-masing manakala gram yodium dan alkohol 95% berfungsi sebagai mordant dan decolourizer, masing-masing.
Pada akhir gram noda, bakteria gram negatif akan diperhatikan dalam warna merah jambu manakala gram bakteria positif akan diperhatikan dalam warna ungu seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 02. Hasil gred noda ditentukan oleh ketebalan lapisan peptidoglycan dalam dinding sel mereka. Semasa langkah decolorizing, noda utama dan mordan mudah dikeluarkan dari bakteria gram negatif dan menjadi tidak berwarna kerana mereka mempunyai lapisan peptidoglycan yang tipis. Noda primer dikekalkan dalam bakteria gram positif kerana ia mempunyai lapisan peptidoglycan tebal. Noda counter tidak akan berkesan untuk bakteria gram positif kerana pengekalan noda primer. Jadi bakteria gram positif akan kelihatan dalam warna noda primer, iaitu warna ungu. Noda counter akan mencemarkan bakteria gram negatif dan akan kelihatan dalam warna pick yang berwarna safranin. Oleh itu, adalah mudah untuk mengkategorikan bakteria kepada dua kumpulan oleh noda gram dan ia adalah sangat berharga dalam pembezaan bakteria dan pengenalan.
Rajah 2: Gram Strain
Budaya mikroba adalah kaedah untuk mengkultur dan menyelenggara mikroorganisma di bawah keadaan makmal untuk tujuan yang berbeza. Budaya ditanam dalam media pepejal, separa pepejal dan cair berdasarkan jenis dan tujuan mikroorganisme. Budaya disediakan dengan nutrien dan syarat pertumbuhan yang diperlukan oleh mikroorganisma. Terdapat komponen yang berbeza dari medium budaya seperti sumber tenaga, sumber karbon, sumber nitrogen, mineral, mikronutrien, air, agen penguat, dll. Suhu optimum, oksigen dan pH perlu diselaraskan mengikut jenis mikroorganisma yang ditanam.
Terdapat pelbagai jenis budaya mikrob; contohnya, budaya kelompok, budaya berterusan, budaya menusuk, kultur agar plat, budaya sup, dan sebagainya. Menurut komposisi medium yang berkembang, terdapat pelbagai jenis media kultur yang dikenali sebagai media sintetik, media semi-sintetik dan media semula jadi. Budaya mikroba disediakan di bawah keadaan steril di dalam ruang khas yang dipanggil aliran udara laminar. Meningkatkan medium dan barangan kaca disterilkan sebelum inokulasi mikroorganisma yang dikehendaki. Di bawah keadaan steril yang betul, mikroorganisma sasaran dipindahkan ke medium nutrien yang disteril dan diinkubasi pada suhu optimum. Di dalam medium, mikroorganisma akan berkembang dan didarab menggunakan nutrien yang disediakan.
Rajah 3: Budaya bakteria pada pinggan
Gram Stain vs Culture | |
Strain gram adalah teknik pewarnaan pembezaan yang digunakan untuk pembezaan bakteria dan pengenalan. | Budaya mikrob adalah kaedah mikroorganisma yang semakin berkembang di makmal. |
Komponen | |
Ini menggunakan reagen yang berbeza termasuk dua noda. | Ini menggunakan media budaya yang berbeza seperti media pepejal, separa pepejal dan cecair yang terdiri daripada nutrien dan keadaan lain yang diperlukan. |
Fungsi Asas | |
Ini membolehkan kumpulan bakteria menjadi dua kumpulan: gram negatif dan gram positif. | Ini membolehkan pendaraban mikroorganisma untuk tujuan yang berbeza. |
Asas | |
Keputusan noda Gram berdasarkan perbezaan lapisan peptidoglycan dinding sel. | Mikroorganisma akan berkembang dan didarab di dalam media kultur. |
Hasilnya | |
Gram bakteria negatif dapat dilihat dalam warna merah jambu dan bakteria gram positif dapat dilihat dalam warna ungu. | Pada plat, koloni mikroorganisma boleh dilihat. Pada media cecair, mikroorganisma dalam bentuk yang digantung. |
Kebudayaan mikrob disediakan dan dikekalkan di bawah keadaan makmal bagi tujuan yang berbeza seperti penyimpanan, pengujian, pembersihan kimia, dan lain-lain. Grain noda adalah prosedur pewarnaan yang membezakan bakteria menjadi dua kumpulan utama yang dinamakan bakteria gram negatif dan bakteria gram positif. Oleh itu, perbezaan di antara gred noda dan budaya adalah gred noda adalah teknik pewarnaan bakteria manakala budaya adalah kaedah penanaman dan penyelenggaraan mikroorganisma di makmal.
Rujukan:
1. Aryal, Sagar. "Gram Staining: Prinsip, Prosedur, Tafsiran, Contoh dan Animasi." Nota Mikrobiologi Dalam Talian. N.p., 20 Sept. 2015. Web. 01 Mac 2017.
2. "Budaya mikrobiologi." Wikipedia. Yayasan Wikimedia, 01 Feb. 2017. Web. 01 Mac 2017
3. Kumar, Sabarish. "Apakah Teknik Asas Budaya Mikroba?" Apakah Teknik Asas Budaya Mikroba? N.p., n.d. Web. 01 Mac 2017
Image Courtesy:
1. "Gram-Cell-wall" Graevemoore inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons
2. "Gram Strain" Oleh fail tamban - Y tambe (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons
3. "Budaya Anthrax" oleh Institut Penyelidikan Perubatan Perubatan Awan Penyakit Berjangkit foto - (Domain Awam) melalui Wikimedia Commons