Perbezaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak

Perbezaan Utama - Electrophoresis Gel mendatar vs Vertikal
 

Elektroforesis gel adalah teknik makmal yang digunakan dalam genetik untuk memisahkan campuran yang mengandungi DNA, RNA, dan protein lain mengikut caj masing-masing dan saiz molekulnya. DNA, RNA atau protein yang perlu dipisahkan dalam kaedah ini dijalankan melalui gel yang mengandungi liang-liang kecil. Molekul digerakkan melalui gel dengan medan elektrik. Molekul-molekul melewati liang gel, dan kelajuan pergerakan berkadar songsang dengan panjang masing-masing. Oleh itu, molekul dengan saiz molekul yang lebih rendah akan bergerak lebih cepat daripada molekul dengan berat molekul yang lebih tinggi. Medan elektrik dihasilkan oleh perbezaan yang dikenakan pada dua hujung gel. Satu hujung mengandungi caj positif, dan hujung yang lain mengandungi caj negatif. Oleh kerana molekul DNA dan RNA dikenakan secara negatif, mereka akan tertarik ke arah akhir gel yang dikenakan positif. Elektroforesis Gel boleh terdiri daripada dua kaedah berbeza: elektroforesis gel mendatar dan elektroforesis gel menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penampan berlari berterusan yang terdapat di dalam kotak gel itu sendiri. Dalam elektroforesis gel menegak, sistem penampan berorientasikan secara menegak dan tidak berterusan dengan dua ruang hadir di bahagian atas dan bawah dengan katod dan anod, masing-masing. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel mendatar dan menegak.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Elektroforesis Gel Horizontal
3. Apakah Elektroforesis Gel Vertikal
4. Kesamaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak
5. Side by Side Perbandingan - Gel Elektroforesis Gel Vertikal dan Mendatar dalam Borang Tabular
6. Ringkasan

Apakah Elektroforesis Gel Horizontal?

Elektroforesis gel mendatar menggunakan teori asas untuk pemisahan DNA, RNA atau molekul protein mengikut saiz dan kadar molekul masing-masing. Dalam teknik ini, gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penampan yang berterusan. Gel agarose digunakan untuk memisahkan kotak gel ke dalam dua petak. Satu hujung kotak gel mengandungi anod manakala hujung yang lain mengandungi katod. Apabila arus digunakan, penampan yang digunakan dalam teknik ini membolehkan penciptaan kecerunan caj. Apabila caj dikenakan, gel cenderung menjadi panas. Penampan juga berfungsi sebagai penyejuk, yang mengekalkan suhu pada paras optimum. Perambatan penimbal yang berlarutan menghalang pembentukan kecerunan pH. Sistem penampan tidak berterusan tidak boleh digunakan dalam elektroforesis gel mendatar kerana kedua-dua petak sistem gel terhubung dengan penampan yang berjalan. Acrylamide digunakan semasa elektroforesis gel untuk mengasingkan campuran protein.

Rajah 01: Elektroforesis Gel Mendatar

Dalam elektroforesis gel mendatar, acrylamide tidak boleh digunakan kerana kotak gel terdedah kepada oksigen. Kerana kehadiran oksigen, pempolimeran akrilamida dihalang, dan ini mengganggu pembentukan gel. Elektroforesis gel mendatar adalah kaedah tanpa tenaga yang digunakan dalam pemisahan DNA dan RNA.

Apakah Elektroforesis Gel Vertikal?

Teknik elektroforesis gel vertikal berfungsi mengikut teori primer elektroforesis gel, tetapi ia dianggap lebih kompleks daripada kaedah elektroforesis gel mendatar. Teknik ini menggunakan penampan yang tidak berterusan. Katod terletak di ruang atas, dan anod terletak di ruang bawah. Elektrod yang terdapat di setiap petak menyediakan medan elektrik yang diperlukan. Lapisan lapisan nipis dicurahkan di antara dua plat kaca yang dipasang. Oleh itu, bahagian atas gel terendam di ruang atas, dan bahagian bawah gel terendam di dalam ruang di bahagian bawah. Sebaik sahaja arus digunakan, sebahagian kecil penampan bergerak ke ruang bawah dari ruang atas melalui gel. Semasa yang digunakan dalam teknik ini adalah unit minit.

Rajah 02: Elektroforesis Gel Menegak

Dalam elektroforesis gel vertikal, penampan hanya mengalir melalui gel. Ini membolehkan kawalan kecerunan voltan yang tepat semasa peringkat pemisahan. Gel acrylamide boleh digunakan kerana petak-petak tidak terdedah kepada oksigen atmosfera. Oleh kerana saiz liang acrylamide yang lebih kecil, pemisahan yang tepat dapat dicapai dengan resolusi yang lebih tinggi.

Apakah Kesamaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak?

• Kedua-dua sistem berfungsi mengikut teori asas elektroforesis gel.
• Anod dan katod digunakan untuk menyediakan medan elektrik yang diperlukan dalam kedua-dua sistem.

Apakah Perbezaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak?

Electrophoresis Gel Vertikal mendatar dan mendatar
Elektroforesis gel mendatar adalah teknik elektroforesis gel di mana gel hadir dalam orientasi mendatar.	Electrophoresis Gel Vertikal adalah teknik elektroforesis gel di mana gel berorientasikan secara menegak.
Penimbal
Elektroforesis gel mendatar terdiri daripada penampan berterusan.	Penampan berlari tidak berterusan dalam elektroforesis gel menegak.
Penggunaan Acrylamide
Acrylamide tidak boleh digunakan untuk elektroforesis gel mendatar kerana kotak gel terdedah kepada oksigen atmosfera.	Oleh kerana gel tidak terdedah kepada oksigen atmosfera disebabkan oleh dua ruang berasingan, acrylamide boleh digunakan untuk electrophoresis gel vertikal.
Fungsi
Elektroforesis gel mendatar lebih kerap digunakan untuk pemisahan campuran DNA dan RNA tetapi bukan protein.	Elektroforesis gel vertikal digunakan untuk memisahkan campuran protein.

Ringkasan - Electrophoresis Gel mendatar vs Vertikal

Elektroforesis Gel adalah teknik makmal yang digunakan secara meluas dalam pemisahan campuran yang mengandungi molekul DNA, RNA, dan protein. Terdapat dua kaedah elektroforesis gel: elektroforesis gel mendatar dan menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, penampan berlari berterusan semasa elektroforesis gel menegak, ia tidak berterusan. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak. Kedua-dua sistem berfungsi mengikut prinsip umum elektroforesis gel.

Muat turun Versi PDF daripada Electrophoresis Gel Vertikal Mendatar

Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti nota kutipan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak.

Rujukan:

1.Warren, Chad M., et al. "Elektroforesis gel agarose menegak dan elektroblotan protein Berat-Molekul tinggi." Elektroforesis, vol. 24, tidak. 11, 2003, ms 1695-1702., Doi: 10.1002 / elps.200305392.
2. "Sistem Gel Mendatar dan Menegak - Sistem Gel Mendatar." Diagnostik Kebangsaan, Boleh didapati di sini. Diakses pada 28 Ogos 2017.

Image Courtesy:

1. "Alat electrophoresis gel" Oleh Jeffrey M. Vinocur - Kerja sendiri (CC BY 2.5) melalui Wikimedia Commons
2. "Elektroforesis gel polyacrylamide Protein" oleh Jean-Etienne Minh-Duy Poirrier dari Bruxelles, Belgium - Protein dalam elektroforesis gel 1D (CC BY-SA 2.0) melalui Wikimedia Commons