The perbezaan utama antara HPLC dan HPLC yang cepat ialah tekanan pam yang kami gunakan untuk HPLC adalah sekitar 40 MPa manakala tekanan pam untuk HPLC cepat adalah sekitar 3-5 MPa.
Teknik yang paling biasa yang kita gunakan untuk memisahkan komponen campuran adalah "kromatografi cair". Terdapat beberapa teknik untuk mencapai tujuan ini di mana HPLC sangat popular. HPLC bermaksud Kromatografi Cecair Prestasi Tinggi yang mengenal pasti, mengira dan memisahkan komponen campuran cecair secara cepat dan cekap. Fast HPLC adalah aplikasi khusus HPLC yang telah lama menarik perhatian mereka yang terlibat dalam kajian penyelesaian.
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah HPLC
3. Apakah Fast HPLC
4. Side by Side Comparison - HPLC vs Fast HPLC dalam Borang Tabular
5. Ringkasan
HPLC adalah kromatografi cecair prestasi tinggi. Ia menggunakan tekanan tinggi untuk menolak pelarut supaya mereka melewati lajur. Juga, ia adalah cara yang ideal untuk memisahkan dan mengkaji pelbagai sebatian seperti asid amino, asid nukleik, karbohidrat, steroid, antibiotik dan hidrokarbon. HPLC mempunyai banyak kelebihan terhadap kaedah pemisahan campuran lain seperti resolusi yang lebih tinggi dan analisis yang lebih cepat. Ia menghapuskan keperluan untuk repacking dan regenerasi dan menawarkan kawalan yang lebih baik ke atas parameter dan dengan itu, meningkatkan kecekapan pemisahan. Idealnya, HPLC sesuai untuk aplikasi berskala besar kerana ia dapat memisahkan zarah-zarah yang sangat kecil dan membolehkan penggunaan tekanan tinggi yang memudahkan pelarut mengalir dengan mudah.
Rajah 01: HPLC Column
Ringkasnya, kaedah pengendalian teknik HPLC adalah seperti berikut. Pertama, kita perlu memperkenalkan sampel ke dalam aliran fasa mudah alih dalam jumlah kecil diskret menggunakan pam. Tekanan pam perlu dikekalkan pada 40 MPa. Fasa fasa mudah alih ini menyerap melalui lajur HPLC. Kemudian, komponen dalam sampel juga melalui lajur. Walau bagaimanapun, kelajuan pergerakan mereka berbeza antara satu sama lain kerana perbezaan dalam interaksi antara komponen sampel dan penyerap di dalam lajur. Kami menyebut penjerap ini sebagai fasa pegun kerana ia berada di dalam lajur (tidak bergerak). Kemudian, di hujung lajur, kita boleh mengumpul sampel yang elutes dari lajur, oleh itu, kita boleh mengumpul komponen dalam sampel secara berasingan.
Baru-baru ini, saintis penyelidikan di Institut penyelidikan Schering Plow mengembangkan teknik HPLC yang cepat yang merupakan versi canggih HPLC kerana ia membolehkan pemisahan sebatian lebih cepat daripada campuran. Juga, dikenali sebagai HPLC pantas, teknik ini menggunakan zarah silika teras yang disambungkan dengan 2.7um yang dibuat dengan menggabungkan silinder berlium 0.5um ke atas zarah silika pepejal. Ini zarah yang unik dibuat membuat prosedur pemisahan sangat cepat dan juga pada backpressure rendah daripada apa yang kita gunakan dalam HPLC.
Rajah 02: Radas FPLC
HPLC yang cepat mendapat keputusan yang setanding dengan UPLC, tetapi saintis berpendapat bahawa teknik ini lebih baik kerana ia tidak memerlukan peralatan tekanan ultrahigh yang sangat mahal. Apa yang hebat ialah HPLC yang cepat tidak memerlukan sebarang protokol makmal baru.
HPLC adalah kromatografi cecair prestasi tinggi dan HPLC cepat adalah bentuk maju kromatografi cecair prestasi tinggi. Perbezaan utama antara HPLC dan HPLC yang cepat ialah tekanan pam yang kami gunakan untuk HPLC adalah sekitar 40 MPa. Sedangkan tekanan pam untuk HPLC cepat adalah sekitar 3-5 MPa. Tambahan pula, kita boleh memisahkan sebatian yang berbeza seperti asid amino, asid nukleik, karbohidrat, steroid, antibiotik dan hidrokarbon menggunakan teknik HPLC sementara teknik HPLC yang cepat digunakan terutamanya untuk pemisahan protein.
Infographic di bawah ini membentangkan lebih banyak maklumat tentang perbezaan antara HPLC dan HPLC yang cepat.
HPLC adalah teknik kromatografi cair yang telah menjadi sangat popular di seluruh dunia. Fast HPLC adalah versi baru HPLC, saintis penyelidikan di Schering Plow Institute membangunkan teknik baru ini. Perbezaan utama antara HPLC dan HPLC yang cepat terletak pada tekanan pam yang kami gunakan untuk pemisahan itu. Itu dia; tekanan pam yang kami gunakan untuk HPLC adalah sekitar 40 MPa. Tetapi tekanan pam untuk HPLC cepat adalah sekitar 3-5 MPa.
1. "Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 20 Okt. 2018. Boleh didapati di sini
"Anda Perlu Sistem Bergaya untuk Menjalankan HPLC Cepat - atau Adakah Anda?" Fast HPLC - CHROMacademy. Terdapat di sini
1. "HPLC kolom" Door Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) melalui Wikimedia Commons
2. "Lab FPLC" oleh Stephen Helms dari Dallas, TX, Amerika Syarikat - FPLC Lab kami, (CC BY-SA 2.0) melalui Wikimedia Commons