Perbezaan Antara HPLC dan HPTLC

Perbezaan Utama - HPLC vs HPTLC
 

Perbezaan utama antara HPLC dan HPTLC ialah HPLC membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel manakala HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.

Kromatografi adalah kaedah pemisahan fizikal yang digunakan untuk memisahkan dan mengenal pasti komponen dalam campuran. Kedua HPLC dan HPTLC adalah teknik kromatografi. HPLC adalah kromatografi cecair prestasi tinggi. HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah HPLC
3. Apakah HPTLC?
4. Side by Side Comparison - HPLC vs HPTLC dalam Borang Tabular
5. Ringkasan

Apakah HPLC??

HPLC ialah kromatografi cecair berprestasi tinggi. Ini adalah teknik analitik yang digunakan untuk memisahkan, mengenal pasti dan mengukur komponen dalam campuran. Dalam teknik ini, sampel dibubarkan dalam pelarut yang sesuai. Kemudian pelarut dengan sampel diluluskan melalui pam dengan tekanan yang diberikan. Pam itu dipenuhi dengan bahan penyerap pepejal. Kemudian beberapa komponen mengikat dengan kuat ke bahan penyerap sedangkan komponen lain mengikat dengan longgar. Ini menyebabkan komponen mempunyai kadar aliran yang berbeza melalui pam. Oleh itu, komponen boleh dipisahkan dengan mudah.

Rajah 01: Sistem HPLC

Bahan penyerap yang mengisi pam dikenali sebagai fasa pegun. Pelarut dengan sampel terlarut dikenali sebagai fasa bergerak. Pam yang digunakan dalam teknik ini dipanggil lajur. Lajur diisi dengan bahan penyerap, yang paling biasa, zarah silika. Saiz zarah ini mungkin berkisar antara 2-50 μm. Proses pemisahan dipengaruhi oleh komposisi fasa bergerak dan suhu sistem. Interaksi antara fasa pegun dan komponen dalam sampel boleh menjadi interaksi hidrofobik, interaksi dipole-dipole, ikatan ionik, dan lain-lain.

Tekanan operasi HPLC jauh lebih tinggi daripada kromatografi cecair tradisional. Ia terletak di sekitar 50-350 bar. Perbezaan antara kromatografi cecair dan HPLC adalah dalam kromatografi cair, sampel itu jatuh melalui lajur bawah graviti manakala dalam HPLC, sampel itu ditekan melalui lajur. Saiz lajur dan zarah penyerap juga sangat kecil jika dibandingkan dengan kromatografi cecair tradisional. Walau bagaimanapun, resolusi yang diberikan oleh teknik HPLC adalah lebih baik.

Apakah HPTLC itu??

HPTLC ialah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi. Ia adalah bentuk maju dan automatik TLC tradisional. Teknik ini memberikan resolusi yang cekap pada masa yang singkat. Dalam kaedah analisis ini, sampel dan rujukan boleh dianalisis pada masa yang sama, yang membolehkan sampel dibandingkan dengan rujukan. Ia memberikan ketepatan analisis yang lebih baik daripada teknik kromatografi yang lain. Masa yang diambil untuk analisis kurang. Teknik ini adalah teknik kos rendah.

Rajah 02: Analisis Pewarna Makanan menggunakan HPTLC

Kaedah HPTLC adalah proses yang mudah, dan langkah penyediaan sampel juga dihapuskan (Dalam TLC tradisional, langkah penyediaan sampel disertakan sebelum pemisahan. Langkah ini melibatkan pembersihan dan pengayaan). Pelarut ini boleh digunakan secara langsung tanpa sebarang pra-rawatan walaupun teknik kromatografi lain memerlukan pra-rawatan seperti degassing, penapisan, dll..

Bahan penyerap yang digunakan dalam HPTLC adalah silika dengan saiz zarah yang sangat kecil. Dalam TLC tradisional, saiz zarah silika adalah 5-20 μm manakala, dalam HPTLC, ia adalah 4-8 μm. Sampel digunakan pada plat HPTLC menggunakan aplikator. Ia memberikan aplikasi seragam dan selamat. Kemudian plat diletakkan di dalam ruang yang mempunyai fasa bergerak. Ruang harus tepu dengan wap fasa bergerak. Selepas proses HPTLC, tempat yang bergerak dapat dikesan. Apabila mengesan tempat pada plat, teknik HPTLC menggunakan rantau UV yang sesuai atau ruang iodin.

Apakah Perbezaan Antara HPLC dan HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC adalah kromatografi cecair prestasi tinggi.	HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi.
Teknik
Dalam HPLC, fasa bergerak dengan pelarut dilalui melalui lajur yang penuh dengan fasa pegun.	Dalam HPTLC, sampel itu dilihat pada plat TLC dan diletakkan di dalam ruang yang mengandungi fasa bergerak; maka sampel dibenarkan untuk memindahkan ke atas plat bersama dengan fasa bergerak.
Pengukuran
Dalam HPLC, perbezaan antara kadar aliran komponen melalui lajur digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel.	Dalam HPTLC, perbezaan antara jarak yang dilalui oleh setiap komponen dalam sampel digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel.
Pemisahan Kuantitatif
HPLC membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.	HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.

Ringkasan - HPLC vs HPTLC

HPLC dan HPTLC adalah dua teknik kromatografi. Perbezaan utama antara HPLC dan HPTLC ialah HPLC membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel manakala HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.

Rujukan:

1. "Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 10 Apr. 2018, Boleh didapati di sini.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30 Mei 2011, Available here.

Image Courtesy:

1. "HPTLCplatetoMS" Oleh Kjaergaard di Wikipedia Bahasa Inggeris - Dipindah dari en.wikipedia ke Commons (Public Domain) melalui Wikimedia Commons
2. "Hplc" Oleh PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAssociate Professor (Privatdozentin) University of HohenheimInstitute of Chemistry Food - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Wikimedia Commons