Perbezaan Antara Immunofluorescence dan Immunohistochemistry

Perbezaan Utama - Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
 

Diagnostik penyakit, yang menggunakan kaedah biologi molekul, telah menjadi kawasan baru muncul teknologi makmal klinikal. Ini termasuk semua ujian dan kaedah untuk mengenal pasti penyakit dan memahami punca penyakit dengan menganalisis DNA, RNA atau protein yang dinyatakan dalam organisma. Kemajuan pesat dalam diagnosis molekul telah memungkinkan penyelidikan asas mengenai penyakit berjangkit dan tidak berjangkit. Ini digunakan untuk menentukan perubahan dalam urutan atau tahap ekspresi dalam gen penting atau protein yang terlibat dalam penyakit. Immunofluorescence (IF) dan Immunohistochemistry (IHC) adalah dua teknik yang digunakan secara meluas dalam biologi kanser. JIKA adalah sejenis IHC di mana kaedah pengesanan pendarfluor digunakan untuk menganalisis antibodi monoklonal dan poliklonal, sedangkan IHC menggunakan kaedah berasaskan kimia untuk mengesan antibodi monoklonal dan poliklonal. Ini adalah perbezaan utama antara IF dan IHC.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Immunofluorescence 
3. Apakah Imunohistokimia
4. Kesamaan Antara Immunofluorescence dan Immunohistochemistry
5. Side by Side Comparison - Immunofluorescence vs Immunohistochemistry dalam Borang Tabular
6. Ringkasan

Apakah Immunofluorescence (IF)?

Immunofluorescence adalah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam assay dilabel menggunakan pewarna pendarfluor atau protein neon untuk tujuan pengesanan. Dilabel antibodi sekunder boleh menyebabkan isyarat latar belakang yang tidak diingini; oleh itu, teknik IF didasarkan pada pelabelan antibodi utama pada masa ini untuk mengelakkan isyarat yang tidak diingini semasa pengesanan. Melalui teknik ini, pengikatan yang tidak spesifik antara antibodi utama dan menengah dihalang, dan ia lebih cepat kerana tidak ada langkah inkubasi sekunder yang terlibat. Kualiti data juga bertambah baik.

Rajah 01: Double immunofluorescence pewarnaan untuk BrdU, NeuN, dan GFAP

Fluorochromes atau pewarna pendarfluor adalah sebatian yang boleh menyerap radiasi, sinaran sinaran ultra violet yang teruja. Apabila zarah mencapai keadaan tanah dari keadaan teruja, mereka memancarkan radiasi yang ditangkap dan dikesan oleh pengesan untuk membentuk spektrum. Adalah sangat penting bahawa label pendarfluor adalah serasi dan stabil untuk tindak balas tertentu dan harus disatukan dengan baik untuk antibodi untuk mendapatkan hasil yang tepat. Salah satu fluorochromes yang paling banyak digunakan adalah fluorescein isothiocyanate (FITC), yang berwarna hijau, dengan penyerapan dan pelepasan panjang gelombang puncak 490 nm dan 520 nm. Rhodamine, agen lain yang digunakan dalam JIKA, berwarna merah dan mempunyai penyerapan dan pemancaran gelombang panjang yang berbeza dari 553 nm dan 627 nm.

Apakah Imunohistokimia (IHC)?

IHC adalah kaedah ujian molekul yang diamalkan untuk mengenal pasti dan mengesahkan kehadiran antigen dalam sel sasaran. Sel sasaran boleh menjadi zarah berjangkit, patogen mikrob atau sel tumor malignan. IHC menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan kehadiran antigen yang terdapat di permukaan sel sel sasaran. Teknik ini adalah berdasarkan pengikatan antigen-antibodi. Penanda pengesanan dikaitkan dengan antibodi ini untuk mengesan kehadiran atau ketiadaan antigen tertentu. Penanda ini boleh menjadi penanda kimia seperti enzim, antibodi bertanda fluoresen atau antibodi berlabel radio.

Rajah 02: Slice Mouse-otak yang diwarnai oleh Immunohistochemistry

Aplikasi IHC yang paling popular adalah dalam biologi sel kanser untuk mengenal pasti kehadiran tumor ganas, tetapi ia juga digunakan untuk mengesan penyakit berjangkit.

Apakah Kesamaan Antara Immunofluorescence dan Immunohistochemistry?

• Immunofluorescence dan Immunohistochemistry berlaku dalam keadaan in vitro.
• Kedua-dua teknik ini berdasarkan kepada antibodi antigen
• Kedua-duanya adalah teknik yang sangat pesat.
• Keputusan teknik dapat direproduksi.
• Keduanya telah meningkatkan kualiti data.
• Teknik-teknik ini digunakan dalam diagnosis kanser dan penyakit berjangkit.

Apakah Perbezaan Antara Immunofluorescence dan Immunohistochemistry?

Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
JIKA adalah teknik pengesanan dimana antibodi yang digunakan dalam assay dilabel menggunakan pewarna neon atau protein neon untuk pengesanan.	IHC adalah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam assay dilabel menggunakan bahan kimia atau unsur radioaktif untuk pengesanan.
Ketepatan
Ketepatan lebih tinggi dalam teknik IF berbanding dengan IHC.	Ketepatan lebih rendah dalam IHC.
Spesifikasi
JIKA lebih spesifik.	IHC kurang spesifik.

Ringkasan - Immunofluorescence vs Immunohistochemistry

Mekanisme molekul telah membawa banyak perubahan dalam bidang perubatan, menimbulkan metode ujian molekul canggih yang telah membawa revolusi dalam bidang diagnostik. Penemuan ini membawa kepada pengenalan dan pengesahan penyakit yang cepat dan tepat, dengan itu membolehkan pentadbiran dan penghasilan ubat yang berjaya. Teknik-teknik ini juga digunakan dalam farmakologi untuk mencari sasaran dadah dan mengesahkan sifat-sifat farmakokinetik ubat semasa metabolisme dadah. JIKA dan IHC adalah dua kaedah diagnostik yang berdasarkan konsep antigen dan antibodi mengikat, walaupun mod pengesanan dalam kedua-dua teknik berbeza. JIKA menggunakan prinsip pendarfluor untuk mengesan antigen dan IHC menggunakan konsep konjugasi kimia untuk mengesan antigen. Ini adalah perbezaan antara IF dan IHC.

Muat turun Versi PDF Immunofluorescence vs Immunohistochemistry

Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti nota kutipan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Immunofluorescence dan Immunohistochemistry.

Rujukan:

1. Aoki, Valéria, et al. "Immunofluorescence langsung dan tidak langsung." Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, Available here. Diakses pada 25 Ogos 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Aplikasi imunohistokimia." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Aug. 2012, Available here. Diakses pada 25 Ogos 2017.

Image Courtesy:

1. "Double immunofluorescence staining for BrdU, NeuN and GFAP" Oleh Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2, Liu X. - Penyerahan Intranasal untuk mengubah faktor pertumbuhan- beta1 dalam tikus selepas strok mengurangkan jumlah infarct dan meningkatkan neurogenesis dalam zon subventricular; PMID 19077183 (CC BY 2.0) melalui Wikimedia Commons
2. "Hypothalamus daripada tisu tikus berwarna oleh ABC-Immunohistochemistry" Oleh zabbn - Kerja sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons