Perbezaan antara Nitrocellulose dan PVDF
Share
Perbezaan Utama - Nitrocellulose vs PVDF
Blotting Barat adalah kaedah yang membolehkan pengesanan dan kuantifikasi protein tertentu dari sampel protein. Kebolehpercayaan teknik bergantung kepada pemilihan membran yang betul untuk penyerapan protein dari gel. Terdapat pelbagai jenis membran microporous. Membran Nitrocellulose dan PVDF adalah dua membran seperti yang diutamakan oleh para penyelidik kerana ciri-ciri khas mereka terhadap jenis lain membran. Pemilihan antara nitrocellulose atau PVDF juga merupakan satu lagi cabaran dalam pembongkaran barat. Kedua-dua nitroselulosa dan PVDF mempunyai kapasiti penyerapan protein yang tinggi. Perbezaan utama antara membran nitrocellulose dan PVDF ialah Membran nitroselulosa tidak mempunyai keupayaan untuk melepaskan antibodi dan menggunakan semula membran untuk reprobing antibodi manakala membran PVDF telah melucutkan dan menggunakan semula keupayaan.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Nitrocellulose
3. Apakah PVDF
4. Side by Side Comparison - Nitrocellulose vs PVDF
5. Ringkasan
Apa itu Nitrocellulose?
Nitrocellulose adalah polimer yang dihasilkan oleh merawat selulosa dengan asid nitrik dan digunakan untuk membuat membran mikropor dalam biologi molekul, terutamanya untuk teknik-teknik pembungkus seperti selatan, utara dan barat. Saiz liang membran nitroselulosa berkisar antara 3 hingga 20 μm. Membran mikrofon Nitrocellulose memudahkan pengesanan tindak balas imunokimia yang berlaku di permukaan membran. Oleh itu, membran nitrocellulose sering digunakan untuk immobilization protein dan pengesanan protein spesifik di blotting barat. Membran Nitrocellulose juga boleh melumpuhkan glikoprotein dan asid nukleik.
Membran Nitrocellulose lebih disukai dalam menguji aliran lateral kerana beberapa ciri. Membran Nitrocellulose menyerap protein pada kepekatan yang tinggi. Pelarut yang digunakan untuk membasahi membran tidak mengurangkan penyerapan protein membran nitrocellulosa. Membran Nitrocellulosa boleh dengan mudah dipotong ke saiz gel yang diingini dan memindahkan protein dari gel ke membran dengan pemindahan elektrik atau kapilari. Nitrocellulose membolehkan aliran lebih cepat protein melalui membran dengan potensi mengikat yang tinggi. Nitrocellulose menunjukkan kekuatan pengendalian yang lebih baik. Satu lagi ciri khas membran nitrocellulosa adalah bahawa ia boleh dengan mudah dilekatkan dengan perekat tahan air bukan pelarut ke pelbagai sokongan plastik.
Rajah 01: Membran Nitrocellulose untuk pembengkakan barat
Apakah itu PVDF??
Polyvinylidene difluoride (PVDF) adalah fluoropolymer yang dihasilkan oleh pempolimeran vinilidena difluoride dan mempunyai keupayaan immobilization protein yang tinggi. Oleh itu, membran microporous yang diperbuat daripada PVDF digunakan dalam teknik pembongkaran barat untuk menganalisis protein tertentu dari campuran protein. Membran PVDF juga boleh digunakan untuk analisis asid amino dan penjujukan protein. Ciri-ciri membran PVDF yang paling penting ke atas membran nitroselulosa ialah ia dapat dengan mudah dilepaskan antibodi dan digunakan semula untuk pemeriksaan antibodi yang seterusnya.
Membran PVDF lebih tebal daripada membran nitrocellulose; Oleh itu, lebih tahan kerosakan ketika menggunakan semula. Membran PVDF sangat hidrofobik. Oleh itu, mereka mesti direndam dalam metanol atau isopropanol sebelum digunakan.
Apakah perbezaan antara Nitrocellulose dan PVDF?
Nitrocellulose vs PVDF | |
| Nitrocellulose adalah polimer yang terdiri daripada selulosa. | PVDF adalah fluoropolymer yang dihasilkan oleh pempolimeran vinilidena difluorida. |
| Saiz Lubang Membran | |
| Saiz liang biasa adalah 0.1, 0.2 atau 0.45μ | Saiz liang biasa ialah 0.1, 0.2 atau 0.45μm |
| Kapasiti Mengikat Protein | |
| Nitrocellulose mempunyai kapasiti mengikat protein 80 hingga 100 μg / cm2. | PVDF mempunyai kapasiti mengikat protein 170 hingga 200 μg / cm2. |
| Kepekaan | |
| Ini mempunyai kepekaan yang rendah berbanding dengan PVDF. | Ini mempunyai sensitiviti yang tinggi. |
| Pengesanan Protein Rendah Dikenal | |
| Oleh kerana kepekaannya rendah dalam membran nitrocellulose, ia tidak sesuai untuk pengesanan protein yang dinyatakan rendah. | Ini lebih sesuai untuk mengesan protein rendah yang dinyatakan kerana sensitiviti yang tinggi. |
| Bunyi Latar | |
| Ini mempunyai bunyi latar belakang yang lebih rendah | Ini mempunyai bunyi latar belakang yang lebih tinggi. |
| Interaksi dengan Protein | |
| Molekul protin mengikat kepada membran nitroselulosa melalui interaksi hidrofobik. | Protein mengikat ke membran PVDF melalui interaksi hidrofobik dan dipole. |
| Jenis Membran | |
| Nitrocellulose rapuh dan rapuh. Walau bagaimanapun, versi nitrocellulose boleh didapati, dan ia tahan. | PVDF lebih tahan lama dan mempunyai rintangan kimia yang lebih tinggi. |
| Keupayaan untuk Strip dan Penggunaan Semula | |
| Nitrocellulose mungkin mengalami kesulitan dalam pelucutan dan reprobing tanpa kehilangan isyarat. | PVDF adalah sesuai untuk mengharamkan dan menyusun permohonan. |
| Kesesuaian | |
| Nitrocellulose sesuai untuk mengesan protein berat molekul yang rendah. | PVDF lebih sesuai untuk mengesan protein berat molekul yang lebih tinggi. |
| Kegunaan Lain | |
| Nitrocellulose boleh digunakan untuk analisis asid nukleik dan dot / slot blotting. | PVDF boleh digunakan untuk penjujukan protein dan sistem ujian fasa pepejal. |
| Kos | |
| Ini lebih murah daripada membran PVDF. | Ini lebih mahal daripada membran nitroselulosa. |
| Perlu untuk Pembasahan Pra | |
| Membran Nitrocellulose tidak memerlukan presoaking dengan metanol | Membran PVDF memerlukan presoaking dengan metanol. |
Ringkasan - Nitrocellulose vs PVDF
Membran Nitrocellulose adalah membran pertama yang digunakan secara komersil untuk ujian aliran sisi. Mereka mempunyai kapasiti tinggi untuk menyerap protein. Oleh itu, membran nitrocellulose digunakan di barat membungkus. PVDF adalah satu lagi jenis membran yang digunakan di bahagian barat dan ia juga mempunyai kapasiti penyerapan protein yang tinggi. Kedua-dua jenis ini digunakan di barat untuk analisis protein. Walau bagaimanapun, membran PVDF mempunyai ciri-ciri yang lebih istimewa, menjadikannya lebih sesuai daripada membran nitrocellulosa untuk membusuk barat. Tetapi, membran nitrocellulose lebih sesuai untuk mengesan protein berwajaran molekul rendah, membran PVDF lebih sesuai untuk mengesan protein berwajaran molekul yang tinggi. Ini adalah perbezaan antara membran nitrocellulose dan PVDF.
Image Courtesy:
1. "Pemindahan blot Barat" Oleh Bensaccount di Wikipedia bahasa Inggeris (CC BY 3.0) melalui Wikimedia Commons
Rujukan:
1.Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun, dan Thomas A. Neubert. "Penggunaan Membran Nitrocellulosa untuk Pencirian Protein oleh Spektrometri Massa Penyerapan Laser / Pengionan Matriks." Kimia Analisis. Perpustakaan Perubatan Negara A.S., 15 Julai 2006. Web. 28 Mac 2017
2. "Penanda Molekul dan Bioteknologi Tanaman." Buku Google. N.p., n.d. Web. 28 Mac 2017
3.Malaysia, 8 April 2013 Tweet. "The Magic's In the Membrane: Pilih bijak untuk Best Blot Results." Biocompare. N.p., 08 Apr. 2013. Web. 28 Mac 2017
