Perbezaan antara Phusion dan Taq Polymerase
Share
Perbezaan Utama - Phusion vs Taq Polimerase
Polimerase DNA digunakan enzim secara meluas dalam teknik biologi molekul dan juga secara semulajadi hadir dalam semua organisma yang menjalani replikasi DNA. Mereka adalah enzim pempolimeran utama yang terlibat semasa replikasi. Polimerase DNA mampu menambah nukleotida ke akhir 3 'bebas dari DNA DNA yang menyebabkan penyambungan helai baru. Pada masa ini, disebabkan perkembangan biologi molekular dalam diagnostik penyakit dan aplikasi perindustrian, adalah penting untuk mengeluarkan polimerase yang mempunyai pelbagai sifat yang bermanfaat. Ini meningkatkan ketepatan kaedah dan menjadikannya teknik yang lebih pesat. Phusion dan Taq polimerase adalah dua enzim polimerase thermostable yang dihasilkan secara komersil yang digunakan dalam aplikasi molekul khas. Phusion adalah polimerase DNA yang diasingkan dari Pyrococcus furiosus dan digunakan terutamanya dalam eksperimen pengklonan untuk meningkatkan kesetiaan. Taq DNA Polymerase adalah polimerase DNA standard yang digunakan dalam Reaksi Rantai Polimerase (PCR), dan ia dipisahkan dari bakteria termostable; Thermus aquaticus. The perbezaan utama antara kedua-dua enzim ini adalah sumber mikroorganisma. Phusion diasingkan daripada ekstrimit, Pyrococcus furiosus sedangkan, Taq polimerase diasingkan dari thermophile, Thermus aquaticus.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Phusion
3. Apakah Taq Polymerase
4. Persamaan Antara Phusion dan Taq Polymerase
5. Side by Side Comparison - Phusion vs Taq Polymerase dalam Borang Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Phusion?
Polimerase DNA Phusion adalah polimerase novel yang dihasilkan dengan mengasingkan enzim dari Pyrococcus furiosus, yang merupakan Archaea ekstremik. Mikroba ini berada dalam keadaan suhu yang sangat tinggi, dengan itu menjadikan polimerase polimerase stabil sangat panas. Polimerase Phusion digunakan untuk mendapatkan kesetiaan yang melampau di atas polimerase termostable konvensional; Taq polimerase. Polimerase Phusion mampu menguatkan template lama sehingga 7.5kb DNA genomik. Kapasiti pempolimeran optimum daripada polimerase Phusion berada pada 720 C. Phusion juga digunakan dalam kloning produk untuk penjujukan, analisis ekspresi dan analisis mutasi.
Polimerase DNA Phusion mempunyai aktiviti exonuclease 3 '- 5'. Ini membolehkan penyegelan semula benang baru yang disintesis selepas sintesis. Oleh itu, ketidaksesuaian nukleotida mudah dibaiki. Oleh itu, ia mempunyai kadar ralat yang lebih rendah. Kelebihan keseluruhan polimerase Phusion adalah;
- Kesetiaan yang melampau
- Kelajuan Tinggi dan mengurangkan masa pelanjutan
- Reaksi yang kuat dan memerlukan pengoptimuman yang minimum
- Hasil yang tinggi
Rajah 01: Phusion
Kekurangan utama polimerase Phusion adalah bahawa ia terhalang dengan kehadiran deoxyuridine triphosphate (dUTP). Apabila dUTP terkumpul dalam campuran tindak balas, ia boleh menghalang tindakan Phimmerase polimer. Ini dihalang dengan merawat campuran reaksi dengan dUTPase sebelum menambah enzim. Pada masa ini, satu variasi tahan polimer DUTP yang dikenali sebagai Pfu Turbo digunakan sebagai pengganti polimerase Phusion sebagai penyelesaian kepada masalah ini.
Apa itu Taq Polymerase?
Taq polimerase DNA ciptaan telah merevolusikan bidang biologi molekul. Ia menyelesaikan masalah utama dalam amplifikasi DNA. Taq polimerase DNA adalah enzim polimerase stabil haba yang diekstrak dan diasingkan daripada bakteria termofilik, Thermus aquaticus. Penemuan enzim ini membawa kepada perkembangan PCR. Enzim ini telah membolehkan penggunaan tindak balas rantai polimerase dalam amplifikasi DNA dan bukannya teknik kloning konvensional. PCR kini digunakan dalam bidang diagnostik molekul, pertanian dan perindustrian dengan banyak variasi baru yang ditambahkan kepada teknik ini.
Rajah 02: Taq Polymerase
Fungsi polimerase DNA Taq pada suhu optimum antara 720C - 800C. Taq Polimerase DNA memerlukan faktor-faktor; magnesium untuk fungsinya. Taq polimerase tidak mempunyai keupayaan membuktikan 3 '- 5', oleh itu, kadar kesilapan taq DNA polimerase adalah tinggi berbanding dengan lebih banyak polimerase DNA yang lebih baru seperti polimerase Phusion dan lain-lain Tetapi, populariti taq DNA polimerase kekal sama di seluruh dunia sains kerana kemudahan dan fleksibiliti enzim.
Apakah Kesamaan Antara Phusion dan Taq polimerase?
- Kedua-dua enzim Phusion dan Taq polimerase adalah enzim pempolimeran yang mampu menambahkan nukleotida ke hujung bebas 3 helai DNA.
- Kedua-dua polimerase Phusion dan Taq memerlukan urutan primer untuk memulakan pempolimeran.
- Kedua polimerase Pham dan Taqa adalah stabil haba.
- Kedua-dua Phusion dan Taq polymerases digunakan dalam mekanisme PCR untuk menguatkan DNA.
- Apabila menambah polimerase kepada campuran tindak balas, kedua-dua Phusion dan Taq polimerase ditambah terakhir untuk memastikan kecekapan enzim.
- Kedua-dua polimerase Phus dan Taq secara komersil disintesis untuk tujuan eksperimen biologi molekul.
- Kedua-dua Phusion dan Taq polymerases memerlukan cofactor untuk menyelesaikan fungsinya.
Apakah Perbezaan antara Phusion dan Taq Polymerase?
Phusion vs Taq Polymerase | |
| Phusion adalah polimerase DNA yang diasingkan dari Pyrococcus furiosus dan digunakan terutamanya dalam eksperimen pengklonan untuk meningkatkan kesetiaan. | Taq DNA Polymerase adalah polimerase DNA standard yang digunakan dalam Reaksi Rantai Polimerase (PCR), dan ia diasingkan dari bakteria termostable, Thermus aquaticus. |
| Organisme Sumber | |
| Phusion diekstrak dari archaea ekstrifilik - Pyrococcus furiosus. | Kerja-kerja sastera ini berkisar dari tempoh penjajahan hingga tempoh dekolonisasi. |
| Keupayaan membaca bukti | |
| Kemampuan membaca 3 '- 5' terdapat dalam Phusion. | Kemampuan membaca 3 '- 5' tidak hadir dalam Taq polimerase. |
| Kesetiaan | |
| Kesetiaan yang tinggi ada dengan Phusion. | Taq polimerase menunjukkan kesetiaan yang rendah. |
| Amplifikasi | |
| Phusion mampu menguatkan serpihan DNA panjang. | Taq polimerase mampu menguatkan serpihan DNA yang lebih pendek. |
| DUTP Keracunan | |
| Tindakan Phusion dihalang oleh pengumpulan ganjil. | Taq polimerase tidak dihalang oleh dUPT. |
Ringkasan - Phusion vs Taq polimerase
Polimerase Phusion dan Taq DNA adalah dua polimerase stabil haba yang digunakan dalam teknik PCR. Phusion adalah polimerase yang diasingkan dari ekstrimit, Pyrococcus furiosus sedangkan Taq diasingkan dari bakteria termostable Thermus aquaticus. Penemuan polimerase DNA Taq membawa kepada penemuan PCR. Phusion mempunyai banyak kelebihan berbanding Taq yang menjadikan Phusion sebagai pilihan yang lebih baik dalam menghasilkan DNA kesetiaan yang tinggi. Walau bagaimanapun, Taq polimerase masih digunakan sebagai enzim polimerase piawai dalam PCR. Ini adalah perbezaan antara Phusion dan Taq polimerase.
Rujukan:
1.Biolabs, New England. "Taq DNA Polymerases." New England Biolabs: Reagen untuk Industri Sains Hayat. Terdapat di sini
2. "Polimerase DNA Phusion." New England Biolabs. Terdapat di sini
Image Courtesy:
1.'GAM digambarkan oleh Nivin Nasri'By NivinN - Kerja sendiri, (CC BY-SA 4.0) melalui Wikimedia Commons
2.'Taq'By Adenosine - Kerja sendiri, (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons
