Perbezaan Antara Budaya Sel Rendah dan Menengah

Perbezaan Utama - Primer vs Budaya Sel Sekunder
 

Sebelum membincangkan perbezaan antara Budaya Sel Rendah dan Menengah, mari kita mulakan secara ringkas apa budaya sel apa. Budaya sel adalah proses mengeluarkan sel dari haiwan atau tumbuhan dan pertumbuhan seterusnya dalam persekitaran yang dikawal secara buatan. Sel-sel ini boleh dialih keluar secara langsung dari tisu dan disebarkan oleh kaedah enzimatik atau mekanikal atau boleh diperolehi daripada budaya yang telah pun ditubuhkan. Perbezaan utama antara budaya sel primer dan menengah ialah Sel-sel untuk kultur sel primer diperoleh secara langsung dari tisu haiwan atau tumbuhan, sementara sel-sel untuk budaya sel menengah diperolehi daripada budaya utama yang telah ditetapkan. Oleh itu, budaya menengah adalah budaya baru yang berasal dari budaya utama.

Mari kita lihat lebih jauh ke dalam makna budaya sel primer dan menengah untuk membezakan mereka dengan lebih baik.

Apakah Budaya Sel Primer??

Budaya sel utama ialah pemisahan sel dari haiwan haiwan atau tisu tumbuhan melalui langkah enzim atau mekanikal dan mengekalkan pertumbuhan sel dalam substrat yang sesuai dalam bekas kaca atau plastik di bawah keadaan persekitaran terkawal. Sel-sel dalam budaya primer mempunyai karyotype yang sama (bilangan dan penampilan kromosom dalam nukleus sel eukariotik) seperti sel-sel dalam tisu asal. Budaya sel primer boleh dikelaskan kepada dua berdasarkan jenis sel yang digunakan dalam budaya.

• Anchorage Dependent atau Cell Adherent - Sel-sel ini memerlukan lampiran untuk pertumbuhan. Sel-sel perunding biasanya berasal dari tisu-tisu organ, contohnya dari buah pinggang di mana sel tidak bergerak dan tertanam dalam tisu penghubung.

• Anchorage Cell Bebas atau Suspensi - Sel-sel ini tidak memerlukan lampiran untuk pertumbuhan. Dalam erti kata lain, sel-sel ini tidak melekat pada permukaan kapal budaya. Semua budaya penggantungan berasal daripada sel-sel sistem darah; Sebagai contoh, limfosit sel darah putih digantung dalam plasma.

Sel yang berasal dari budaya utama mempunyai jangka hayat yang terhad. Sel tidak dapat dipegang selama-lamanya disebabkan oleh beberapa sebab. Meningkatkan nombor sel dalam budaya utama akan menyebabkan keletihan substrat dan nutrien. Juga, aktiviti selular akan secara beransur-ansur meningkatkan tahap metabolit toksik dalam budaya yang menghalang pertumbuhan sel selanjutnya.

Pada peringkat ini, menengah atau subkultur perlu dilakukan untuk memastikan pertumbuhan sel berterusan.

Apakah Budaya Sel Secondary?

Seperti yang dijelaskan di atas, apabila sel-sel dalam budaya adheren menduduki semua substrat yang ada atau apabila sel-sel dalam budaya penggantungan melampaui kapasiti medium untuk menyokong pertumbuhan lebih lanjut, percambahan sel mula dapat mengurangkan atau berhenti sepenuhnya. Untuk mengekalkan ketumpatan sel optimum untuk pertumbuhan yang berterusan dan untuk merangsang percambahan lagi, budaya utama perlu dibina. Proses ini dikenali sebagai budaya sel menengah.

Semasa budaya sel menengah, sel-sel dari budaya utama dipindahkan ke sebuah kapal baru dengan medium pertumbuhan segar. Proses ini melibatkan menghapuskan media pertumbuhan terdahulu dan memisahkan sel-sel yang dipatuhi dalam budaya utama yang berpengaruh. Pengkulturan sel sekunder secara berkala diperlukan untuk menyediakan sel-sel dengan ruang yang semakin meningkat dan nutrien segar, dengan itu, memanjangkan hayat sel-sel dan mengembangkan sejumlah sel dalam kultur.

Menengah menanam sejumlah kultur primer ke dalam jumlah pertumbuhan medium segar yang sama membolehkan penyelenggaraan jangka panjang sel-sel. Kultur menengah ke dalam jumlah pertumbuhan medium segar yang lebih besar diamalkan untuk meningkatkan bilangan sel, contohnya dalam proses perindustrian atau eksperimen saintifik.

Apakah Perbezaan antara Budaya Sel Primer dan Budaya Sel Sekunder??

Seperti yang telah kita fahami kedua-dua istilah secara berasingan, kita akan membandingkan kedua-dua untuk mencari perbezaan lain di antara mereka.

Kapan Menggunakan Budaya Sel Rendah dan / atau Sekunder

Ini bergantung pada apa yang anda ingin pelajari dan jenis eksperimen yang anda lakukan.

Kebudayaan Sel Rendah: Ini adalah proses yang akan digunakan untuk sel-sel kultur dari tisu ibu bapa yang menjadi perhatian. Sel-sel dalam budaya utama akan mempunyai jangka hayat yang terhingga kerana keletihan substrat dan nutrien dan membina toksin, dengan pertumbuhan penduduk. Budaya utama, walaupun teknik pemisahan yang digunakan dalam proses pengasingan, mungkin mengandungi beberapa jenis sel. Walau bagaimanapun, ini mungkin tidak menjadi masalah dalam semua jenis eksperimen dan dalam keadaan seperti itu budaya utama sahaja boleh digunakan.

Budaya Sel Sekunder:  Biasanya, bilangan sel yang diperoleh daripada budaya utama tidak mencukupi dalam eksperimen. Budaya sel sekunder memberi peluang untuk memperluas populasi sel dan juga memanjangkan jangka hayat. Ini membolehkan pemilihan sel lagi dengan penggunaan media selektif dan membolehkan keseragaman genotip dan fenotip dalam populasi. Proses ini digunakan untuk menghasilkan kebudayaan meniru untuk pencirian asas, pemeliharaan, dan eksperimen.

Kemiripan dengan Tisu Ibu Bapa

Kebudayaan Sel Rendah: Sel-sel untuk kultur sel primer diperoleh secara langsung dari tisu haiwan atau tumbuhan. Oleh itu, sel-sel dalam budaya utama menyerupai tisu ibu bapa dan dengan itu, tindak balas biologi mungkin lebih dekat kepada keadaan dalam vivo daripada budaya sel menengah.

Budaya Sel Sekunder: Budaya sel sekunder berasal dari budaya sel primer. Walaupun sub-kultur memanjangkan jangka hayat sel, terdapat kemungkinan bahawa selepas beberapa fasa, sel-sel mungkin berubah atau mungkin kehilangan kendali untuk tidak membahagikan lebih daripada jumlah tertentu. Ini mungkin disebabkan oleh mutasi atau pengubahan genetik dalam sel-sel utama semasa sub-kultur. Sebagai contoh, sesetengah mikroorganisma cenderung menyesuaikan diri dengan keadaan kultur, yang kebanyakannya berbeza dengan persekitaran semulajadi mereka, dengan mengubah biologi mereka.

Proses Pembudayaan - Mendapatkan Sel

Kebudayaan Sel Rendah: Dalam budaya sel primer, tisu haiwan atau tumbuhan akan melalui fasa pembilasan, pembedahan, dan pengasingan mekanikal atau enzim. Tisu terkumpul akan mengandungi pelbagai jenis sel yang berlainan, dan ini mungkin memerlukan penggunaan teknik pemisahan untuk mengasingkan sel-sel kepentingan.

Budaya Sel Sekunder: Dalam budaya sel menengah, jika budaya utama adalah budaya berpayuh, langkah pertama adalah untuk melepaskan sel-sel dari lampiran (permukaan kapal kebudayaan) dengan cara mekanikal atau enzim. Kemudian, sel-sel mesti terpisah dari satu sama lain untuk membentuk penggantungan sel tunggal.

Bilangan Sel dalam Kebudayaan

Kebudayaan Sel Rendah: Tidak diinginkan untuk mempunyai penggantungan sel tunggal mutlak, kerana kebanyakan sel utama bertahan lebih baik dalam kelompok kecil.

Budaya Sel Sekunder: Ia mencukupi untuk menjana penggantungan sel tunggal.

Rentang Budaya Hidup

Kebudayaan Sel Rendah: Kebudayaan sel primer mempunyai jangka hayat yang terhad. Seperti yang dijelaskan di atas, ini adalah kerana pertumbuhan sel-sel meletus substrat dan nutrien dan membawa kepada pengumpulan metabolit toksik. Hasilnya, secara beransur-ansur kadar pertumbuhan sel menurun, menyebabkan kematian sel.

Budaya Sel Sekunder: Budaya sel sekunder memanjangkan jangka hayat sel. Sub-kultur berkala boleh menghasilkan sel-sel abadi melalui transformasi atau pengubahan genetik sel-sel utama.

Risiko Pencemaran

Kebudayaan Sel Rendah: Budaya sel utama lebih sukar untuk dijaga. Pada amnya, budaya sel utama memerlukan campuran yang kaya dengan asid amino, mikronutrien, hormon tertentu dan faktor pertumbuhan. Akibatnya, risiko pencemaran dalam budaya sel utama lebih tinggi daripada budaya sel menengah.

Budaya Sel Sekunder: Kultur sel sekunder adalah relatif mudah dikekalkan, dan risiko pencemaran lebih rendah daripada budaya sel utama.

Dalam artikel ini, kami telah cuba memahami istilah budaya sel primer dan budaya sel kedua diikuti dengan perbandingan untuk menyerlahkan perbezaan utama di antara mereka. Perbezaan asas terletak pada bagaimana sel berasal dari budaya; Sel-sel untuk kultur sel primer diperoleh secara langsung dari tisu haiwan atau tumbuhan, manakala sel-sel untuk kultur sel menengah diperolehi dari budaya utama yang telah ditetapkan.

Rujukan: Asas Kebudayaan Sel - Buku Panduan oleh Invitrogen dan Gibco Freshney, R. I. (2006). Prinsip Asas Kebudayaan Sel. Pusat Onkologi dan Farmakologi Gunaan.   Image Courtesy: "Culture Cell" oleh Umberto Salvagnin (CC BY 2.0) melalui Flickr