Perbezaan Antara RP HPLC dan HIC

The perbezaan utama antara RP HPLC dan HIC ialah RP HPLC menggunakan fasa mudah alih yang lebih polar dan fasa pegun yang kurang polar. Sedangkan HIC menggunakan fasa pegun hidrofobik yang membolehkan molekul hidrofobik dilampirkan kepadanya.

Chromatography adalah teknik analisis yang membantu untuk memisahkan campuran ke dalam komponennya. Pertama, kita perlu membubarkan sampel untuk dipisahkan menjadi penyelesaian. Campuran bahan penyelesaian ini dipanggil fasa bergerak. Kemudian fasa bergerak dilalui melalui bahan lain yang dikenali sebagai fasa pegun. Tahap pegun menentukan pemisahan komponen. Pemisahan berlaku disebabkan pembahagian bahan antara fasa mudah alih dan fasa pegun.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah RP HPLC
3. Apakah HIC
4. Side by Side Comparison - RP HPLC vs HIC dalam Borang Tabular
5. Ringkasan

Apakah RP HPLC??

Istilah RP HPLC bermaksud Kromatografi cecair prestasi tinggi terbalik. Ia melibatkan pemisahan komponen dalam campuran, menurut hydrophobicity. Komponen hidrofobik dalam pautan fasa mudah alih dengan ligan hidrofobik tak bergerak pada fasa pegun, sementara komponen hidrofilik elus melalui fasa pegun tanpa melekat pada permukaan fasa pegun.

Rajah 01: Radas HPLC

Selain itu, kaedah ini mempunyai lebih banyak kebolehulangan berbanding dengan teknik kromatografi yang lain, dan ia juga menunjukkan kebolehgunaan luas. Oleh itu, kami menggunakan kaedah ini di makmal untuk lebih dari 75% daripada semua kaedah HPLC. Kebanyakan masa, kita menggunakan campuran air berair dengan pelarut organik polar terlarut sebagai fasa bergerak. Oleh itu, ia akan memastikan pemasangan komponen hidrofobik dalam penyelesaian ke permukaan fasa pegun.

Apa itu HIC?

Istilah HIC bermaksud Kromatografi Interaksi Hidrofobik. Ia adalah sejenis fasa terbalik HPLC, dan kaedah ini digunakan terutamanya untuk pemisahan biomolekul besar seperti protein. Dalam kaedah ini, kita perlu menggunakan medium berair untuk membuat sampel biomolekul. Ia adalah kerana pelarut organik boleh menyebabkan penularan protein. Selain itu, teknik ini menggunakan interaksi antara molekul besar dengan permukaan hidrofobik sedikit fasa pegun. Selain itu, kita perlu menggunakan kepekatan garam yang tinggi dalam sampel kerana ia menggalakkan protein disimpan di dalam pembungkusan; proses ini dipanggil garam. Dengan mengurangkan kepekatan garam secara beransur-ansur, kita boleh membuat biomolekul elus secara berasingan mengikut hidrofobisiti mereka.

Biasanya, kaedah ini menggunakan syarat-syarat yang bertentangan dengan kromatografi pertukaran ion. Dalam teknik ini, pertama, kita perlu lulus penyelesaian penampan melalui lajur untuk mengurangkan pelarut larut dalam sampel. Ia menjadikan kawasan hidrofobik protein terekspos. Walau bagaimanapun, apabila molekul lebih hidrofobik, kurang garam diperlukan untuk mempromosikan pengikat. Di sini, larutan hidrofobik yang kurang dimusnahkan terlebih dahulu, dan mengikut perubahan kepekatan garam, lebih banyak larutan hidrofobik dihidupkan terakhir.

Apakah Perbezaan Antara RP HPLC dan HIC?

Kromatografi adalah teknik analisis untuk pemisahan komponen dalam campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbezaan utama antara RP HPLC dan HIC ialah RP HPLC menggunakan fasa bergerak lebih kutub dan fasa pegun kurang polar, sedangkan HIC menggunakan fasa pegun hidrofobik, yang membolehkan molekul hidrofobik melekat padanya.

Infographic di bawah merangkumi perbezaan antara RP HPLC dan HIC.

Ringkasan - RP HPLC vs HIC

Kromatografi adalah teknik analisis untuk pemisahan komponen dalam campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbezaan utama antara RP HPLC dan HIC ialah RP HPLC menggunakan fasa bergerak lebih kutub dan fasa pegun yang kurang polar, sedangkan HIC menggunakan fasa pegun hidrofobik, yang membolehkan molekul hidrofobik melekat padanya.

Rujukan:

1. "Mod Pemisahan HPLC." Waters, terdapat di sini.

Image Courtesy:

1. "HPLC Preparatif" oleh GYassineMrabetTalk & # x2709; Imej vektor W3C yang tidak ditentukan telah dibuat dengan Inkscape. - Kerja sendiri (CC BY 3.0) melalui Wikimedia Commons