TLC dan HPTLC adalah dua teknik kimia yang digunakan untuk memisahkan komponen tidak berubah-ubah dalam campuran. Perbezaan utama antara TLC dan HPTLC ialah bahan penyerap dalam Plat TLC mempunyai zarah besar manakala plat HPTLC mempunyai zarah yang sangat kecil bahan penyerap.
TLC adalah kromatografi lapisan nipis. HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi, yang merupakan teknik lanjutan apabila dibandingkan dengan kaedah TLC.
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah TLC
3. Apakah HPTLC?
4. Side by Side Comparison - TLC vs HPTLC dalam Borang Tabular
5. Ringkasan
TLC atau kromatografi lapisan nipis adalah teknik kimia asas yang digunakan untuk memisahkan komponen tidak berubah-ubah dalam campuran. Eksperimen ini dijalankan menggunakan kepingan kaca, plastik atau kertas. Lembaran ini dilapisi dengan lapisan tipis selulosa atau silika gel (bahan penyerap). Lapisan nipis ini dikenali sebagai fasa pegun TLC. Lembaran ini dikenali sebagai plat TLC.
Sebelum eksperimen, baseline dan topline ditandakan dengan pensil pada plat TLC. Kemudian sampel itu dilihat di sepanjang garis ini menggunakan tiub kapilari. Selepas itu, plat TLC ditempatkan secara menegak dalam fasa mudah alih. Fasa mudah alih adalah pelarut (atau campuran pelarut) yang diletakkan dalam bekas. Apabila meletakkan plat TLC dalam fasa mudah alih ini, seseorang harus menyimpan garis dasar di atas margin pelarut. Jika tidak, sampel akan dibubarkan dalam pelarut.
Plat TLC dibenarkan untuk tinggal di fasa mudah alih untuk beberapa waktu. Kemudian, dengan masa, fasa bergerak naik ke atas plat akibat tindakan kapilari. Jika sampel itu larut dalam fasa mudah alih, ia akan naik ke atas bersama dengan fasa bergerak.
Prinsip "seperti larut seperti" adalah di sebalik kaedah TLC ini. Ini bermakna sebatian polar dibubarkan dalam pelarut polar manakala sebatian nonpolar dibubarkan dalam pelarut nonpolar. Fasa pegun biasanya gel silika atau selulosa, yang merupakan sebatian polar. Fasa mudah alih yang digunakan adalah pelarut nonpolar seperti heksana. Oleh itu, jika sampel mengandungi sebarang komponen nonpolar, komponen-komponen ini akan berhijrah ke atas bersama dengan fasa bergerak. Komponen kutub akan berpegang kepada plat. Antara komponen yang bergerak, sebatian sederhana yang tidak berpengaruh akan berhijrah secara perlahan manakala sebatian nonpolar akan berhijrah dengan cepat. Apabila bahagian pelarut telah mencapai garis teratas plat TLC, plat dibawa keluar dan dibiarkan kering.
Rajah 01: Teknik TLC
Sekiranya komponen dalam sampel itu adalah sebatian berwarna, terdapat tempat berwarna-warni di atas plat di lokasi yang berbeza. Tetapi jika komponen tidak berwarna, beberapa teknik lain harus digunakan; contohnya penyemburan ninhidid untuk mengesan ammonia atau amina (amina utama dan amina sekunder).
HPTLC atau kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi adalah bentuk kromatografi lapisan tipis (TLC). Resolusi dan ketepatan HPTLC sangat tinggi. Kebanyakan langkah teknik ini boleh diautomatikkan.
Plat yang digunakan dalam HPTLC mengandungi zarah gel silika dengan saiz yang sangat kecil dan kepadatan pembungkusan gel pada plat adalah tinggi. Permukaan plat licin dan memberikan pemisahan yang cekap. Analisis ini lebih cepat daripada teknik TLC. Kepekaan kaedah ini juga tinggi. Di HPTLC, beberapa sampel berbeza boleh dipisahkan dalam plat yang sama tanpa sebarang langkah penyediaan sampel.
TLC vs HPTLC | |
TLC adalah kromatografi lapisan nipis. | HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi. |
Teknik | |
Ia adalah teknik kimia asas yang digunakan untuk memisahkan komponen tidak berubah-ubah dalam campuran. | Ia adalah bentuk kromatografi lapisan tipis (TLC). |
Plate | |
Plat TLC boleh dibuat daripada kertas, plastik atau kaca yang digunakan dengan bahan penyerap yang mempunyai zarah besar. | Plat HPTLC mempunyai zarah-zat penyerap yang sangat kecil. |
Resolusi | |
Kaedah TLC memberikan resolusi yang lemah apabila sampel mempunyai komponen yang mempunyai sifat yang sama. | Kaedah HPTLC memberikan resolusi tinggi. |
Masa | |
Teknik TLC adalah teknik yang memakan masa. | HPTLC memberi keputusan pada kelajuan yang lebih tinggi daripada kaedah TLC. |
HPTLC adalah bentuk maju TLC. Perbezaan utama antara TLC dan HPTLC adalah bahawa plat TLC boleh dibuat daripada kertas, plastik atau kaca yang digunakan dengan bahan penyerap yang mempunyai zarah besar manakala plat HPTLC mempunyai zarah yang sangat kecil bahan penyerap.
1. "Chromatography Thin-Layer." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 6 Apr. 2018, Boleh didapati di sini.
2. Libretexts. "Kromatografi Layer Nipis." Chemistry FreeTexts, Libretexts, 3 Nov. 2017, Available here.
3. "Kromatografi Nipis Pelapisan Berkualiti Tinggi." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 17 Feb. 2018, Boleh didapati di sini.
1. "Urutan Tlc" Oleh Quantockgoblin - wiki (Domain Awam) melalui Wikimedia Commons