Transformasi vs Transfection
Transformasi dan pemindahan adalah dua teknik mudah digunakan untuk memperkenalkan gen asing ke dalam sel tuan rumah. Walau bagaimanapun, teknik ini bergantung pada jenis sistem hos atau vektor.
Apakah Transformasi Sel??
Transformasi adalah teknik yang digunakan untuk memperkenalkan gen ke ragi dan sel bakteria. Teknik ini biasanya menyebabkan perubahan gen dalam, dan dengan itu ungkapan gen tetap. Transformasi bakteria mula diperkenalkan pada tahun 1928 oleh Frederick Griffith. Kemudian pada awal tahun 1970an, teknik ini telah digunakan E coli. Semasa proses transformasi E coli, sel-sel ini direndam dalam penyelesaian ais sejuk CaCl2. Langkah ini membuat E coli sel-sel yang cekap. Selepas itu, sel-sel yang kompeten bercampur dengan DNA plasmid dan diinkubakan pada ais selama 20-30 minit. Kemudian kejutan panas pendek diberikan untuk membolehkan pemindahan DNA ke dalam sel. Akhirnya, sel-sel diletakkan dalam sup nutrien dan diinkubasi pada 37 ° C selama 60-90 min untuk menubuhkan plasmids. Sebaik sahaja langkah-langkah ini berjaya diselesaikan, sel-sel yang diubah dapat ditempatkan pada media yang sesuai untuk penyebaran sel. Oleh kerana, transformasi dianggap sebagai teknik yang tidak efisien, ia tidak boleh digunakan untuk penyediaan bank klon.
Apakah Transfeksi Sel?
Transfection adalah kaedah pengenalan gen asing, biasanya, ke dalam sel-sel mamalia. Terdapat dua kaedah pemindahan; iaitu transfection sementara dan transfeksi yang stabil. Dalam transfection sementara, ungkapan gen tersedia untuk masa yang terhad; Oleh itu, perubahan gen menyebabkan ekspresi sementara. Kaedah transfeksi ini mudah dan cepat; Oleh itu ia boleh digunakan secara rutin. Satu kelemahan transfection sementara adalah kesukaran untuk memohon sistem sintesis protein berskala besar.
Semasa transfeksi yang stabil, gen sasaran disatukan ke dalam genom sel tuan rumah, dan oleh itu ungkapan gen tetap, tidak seperti transfeksian sementara.
Apakah perbezaan antara Transformasi dan Transfeksi?
• Transformasi adalah pengenalan gen menjadi sel prokariotik (bakteria dan ragi), sedangkan transfeksi biasanya dipanggil pengenalan gen menjadi sel mamalia.
• Kesan transformasi dalam perubahan yang saksama, dalam gen, sedangkan transfeksi boleh menyebabkan ekspresi sementara atau perubahan kekal dalam gen.