Perbezaan Antara Transfection Transient dan Stabil

Perbezaan Utama - Transient vs Transfection Stabil
 

Transfection adalah proses yang terlibat dalam pemindahan gen sel eukariotik menggunakan kaedah kimia atau fizikal. Transfeksi boleh diklasifikasikan ke dalam dua jenis utama yang dinamakan transfection sementara dan transfection yang stabil. Semasa transfection sementara, gen kepentingan tidak dapat digabungkan dengan genom tuan rumah dan dinyatakan secara temporali di dalam tuan rumah untuk jangka pendek sedangkan, dalam transfeksi yang stabil, gen kepentingan mengintegrasikan dengan genom tuan rumah dan dikekalkan untuk jangka panjang dalam beberapa generasis. Ini adalah perbezaan utama antara transfeksi sementara dan stabil. Dalam kedua-dua kes, transfeksi berjaya, dan gen dinyatakan.

KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Transfeksi Transien
3. Apakah Transfection Stabil?
4. Side by Side Comparison - Transient vs Stabil Transfection
5. Ringkasan

Apakah Transfeksi Transien?

Transfection merupakan alat penting untuk memasukkan gen ke dalam sel eukariotik. Di antara kedua-dua jenis transfection, transfection sementara adalah cara biasa dalam pemindahan gen. Melalui vektor, gen asing diubah di dalam sel-sel tuan rumah. Apabila DNA asing memasuki sel tuan rumah, ia mempunyai dua pilihan. Ia boleh sama ada dengan genom tuan rumah dan mereplikasi, atau tinggal di dalam tanpa menggabungkan ke dalam genom. Transfeksi sementara mempamerkan ungkapan sementara gen yang dimasukkan tanpa mengintegrasikan ke dalam genom tuan rumah. Gen menzahirkan dan menghasilkan protein berkod sehingga sel membahagi. Walau bagaimanapun, disebabkan ketidakupayaan integrasi, ia tidak dapat meniru dan memasuki generasi akan datang. Transpeksian jenis ini berjaya dalam tempoh masa yang singkat. Semasa pembahagian sel atau disebabkan oleh beberapa faktor lain, DNA asing tertakluk kepada kemerosotan. Transfection sementara ditunjukkan apabila DNA asing berada dalam bentuk DNA yang sangat bergelung.

Rajah 01: Transfection Transient

Apakah Transfection Stabil??

Transfection stabil menunjukkan kejayaan gen asing yang berjaya ke dalam genom tuan rumah. Apabila DNA asing masuk ke dalam sel tuan rumah, sebahagian daripada DNA asing menggabungkan dengan genom tuan rumah dan menjadi sebahagian daripadanya. Oleh itu, DNA asing juga mereplikasi dan melewati generasi masa depan apabila genom tuan rumah berulang. Transpeksian jenis ini kompleks dan jarang terjadi. Bagaimanapun, disebabkan pemindahan yang stabil ke dalam genom, sifat ini dikekalkan untuk tempoh yang lebih lama beberapa generasi.

Transfection yang stabil adalah proses yang sukar dan memerlukan penyebaran DNA DNA dan sel yang efektif dari DNA asing ke dalam genomnya. Oleh itu, DNA linear menyokong transfeksi yang stabil daripada DNA bulat. Walau bagaimanapun, kadar pemindahan transparan yang stabil adalah kira-kira satu dalam 10⁴ berubah sel. Pemindahan yang stabil dapat dilihat oleh cotransfomation penanda yang dipilih dan melakukan pemilihan buatan pada medium.

Rajah 02: Transfection Stabil

Apakah perbezaan antara Transfeksi Transien dan Stabil??

Transient vs Transfection Stable
DNA asing tidak disatukan menjadi genom tuan rumah.	DNA asing digabungkan dengan genom tuan rumah dan menjadi sebahagian daripadanya.
Replikasi dalam Hos
Gen yang trans transisi tidak ditiru dalam tuan rumah. Oleh itu gen tidak diluluskan kepada generasi akan datang.	Gen ditiru di dalam tuan rumah dan diserahkan kepada generasi akan datang.
Tempoh masa Ekspresi Gene
Gen dinyatakan untuk tempoh masa yang terbatas dan selepas itu, ia dimusnahkan.	Gen menjadi sebahagian daripada genom dan dinyatakan dalam generasi untuk jangka masa panjang.
Guna
Ini berguna untuk mengkaji kesan ekspresi jangka pendek gen atau produk gen.	Ini berguna untuk mengkaji kesan ekspresi gen jangka panjang.
Pengesanan Transfeksi
Gen dinyatakan dan mudah dikesan dengan memasukkan gen wartawan.	Pemindahan yang stabil dapat dengan mudah dikesan dengan memasukkan penanda yang dipilih dan memilih melalui pemilihan tiruan pada media.
Kejadian dan Proses
Transfeksi sementara adalah perkara biasa dan tidak kompleks untuk dilakukan.	Transfeksi yang stabil jarang berlaku dan kompleks untuk dilakukan.
Sifat DNA
DNA supercoiled sangat sesuai untuk transfection sementara.	DNA linear sesuai untuk transfeksi yang stabil.
Permohonan
Ini digunakan untuk kajian knockdown gen atau membungkam dengan RNA yang menghambat, pengeluaran protein secara kecil-kecilan	Ini digunakan untuk pengeluaran protein secara besar-besaran, kajian farmakologi jangka panjang, terapi gen, penyelidikan mengenai mekanisme pengawalan genetik jangka panjang

Ringkasan - Transient vs Transfection Stabil

Transfeksi sementara dan stabil adalah dua jenis transfeksi yang ditunjukkan semasa gen memindahkan ke sel eukariotik oleh sistem bukan virus. DNA asing yang berubah tidak disepadukan dengan genom tuan rumah dalam transfection sementara sementara ia digabungkan dengan genom tuan rumah dalam pemindahan yang stabil. DNA bergelung sirkular menunjukkan pemindahan transien sementara DNA linear lebih suka transfection yang stabil. Ini adalah perbezaan antara transfeksi sementara dan stabil. Walau bagaimanapun transfection sementara lebih biasa dan mudah berbanding transfection stabil. Tetapi pemilihan satu daripada dua bergantung kepada tujuan pemindahan gen dan tempoh projek penyelidikan.

Rujukan:
1. Condreay, J. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay, dan Thomas A. Kost. "Ekspresi gen transient dan stabil dalam sel mamalia yang ditransduksi dengan vektor baculovirus rekombinan." Prosiding Akademi Sains Kebangsaan Amerika Syarikat. Akademi Sains Kebangsaan, 05 Jan 1999. Web. 25 Mac 2017
2. Kim, Tae Kyung, dan James H. Eberwine. "Transfeksi sel mamalia: masa kini dan masa depan." Kimia Analisis dan Bioanalytikal. Springer-Verlag, Ogos 2010. Web. 25 Mac 2017