Perbezaan Antara RT-PCR dan QPCR

Reaksi rantai polimerase transkripsi terbalik (RT-PCR)

RT-PCR vs QPCR

Kemajuan dalam bioteknologi telah menghasilkan penemuan beberapa cara untuk menampung permintaan pemindahan organ selama bertahun-tahun. Sebelum ini, seorang individu yang secara sukarela akan mendermakan organ apa-apa selepas kematian kepada pesakit yang memerlukan hanya boleh melompat-memulakan operasi untuk pemindahan. Kajian berterusan dan penyelidikan biologi membawa kepada penemuan sel stem.

Sel stem merujuk kepada yang diambil dari DNA embrio, yang akan berfungsi sebagai sumber untuk penjanaan semula sel-sel yang pada dasarnya akan menjadi klon organ di mana DNA telah diambil. Walaupun aktivis hak asasi manusia melobi untuk menghentikan prosedur tersebut, operasi yang berjaya telah membuktikan keberkesanan perkembangan sel stem dalam pemindahan organ.

Sebelum seseorang dapat memahami dan memahami sepenuhnya sel stem, bagaimanapun, terdapat keperluan untuk dibiasakan dengan istilah yang berbeza yang berkaitan dengan penemuan saintifik ini. Penanaman sel batang melibatkan DNA dan pengekodannya. Oleh itu, adalah penting bagi pelajar atau mana-mana individu yang berminat dalam bidang untuk membezakan antara RT-PCR dan qPCR.

Reaksi rantai polimerase transkripsi terbalik (RT-PCR) adalah salah satu daripada banyak variasi reaksi rantai polimerase, atau PCR. Teknik makmal ini digunakan secara meluas dalam biologi molekular agar para saintis menghasilkan beberapa salinan urutan DNA tertentu melalui proses yang diciptakan sebagai "amplifikasi." Perbezaan antara RT-PCR dan PCR tradisional ialah RNA yang pertama ditranskripsikan secara berlawanan dengan pelengkap DNAnya, yang menggunakan transkripase terbalik. DNA pelengkap baru yang mengandungi transkripsi terbalik akan diperkuat dengan menggunakan PCR tradisional atau PCR masa nyata.

Kebanyakan pelajar yang mempelajari proses ini sering membuat kesilapan interchanging transkripsi PCR terbalik dan PCR masa nyata kerana kedua-duanya disingkat sama. Untuk mengelakkan kekeliruan, ahli biologi melabel PCR masa nyata sebagai PCR masa nyata atau qPCR.

QPCR berbeza jauh dari RT-PCR, kerana qPCR bertanggungjawab untuk mengukur amplifikasi kerana ia berlaku. Boleh dikatakan bahawa RT-PCR memulakan proses penguatan, sementara qPCR mengukurnya sebagai prosedur yang berlaku.

PCR masa nyata kuantitatif

QPCR sebenarnya telah merevolusikan kaedah pendekatan satu hala tradisional apabila mengenal pasti DNA dan RNA, memandangkan kaedah qPCR menjadikan biologi untuk menentukan kepekatan awal asid nukleus walaupun sebelum keputusan tindak balas telah diamati dan jubah ke bawah.

Penggunaan qPCR, yang kini dianggap sebagai teknik analisa yang paling kuat dan sensitif untuk kajian genetik, telah membesar dengan ketara. Ia kini terlibat dalam analisis ekspresi gen kuantitatif, genotyping, pengesanan patogen, dan analisis SNP, bersama-sama dengan ukuran gangguan RNA.

QPCR sering digabungkan dengan proses transkripsi terbalik untuk mengukur RNA dan MicroRNA messenger yang hadir dalam sel-sel tisu yang diperhatikan dan bereksperimen dengan. Ini kemudian memberikan perbezaan yang nyata antara kedua-dua: RT-PCR boleh digunakan untuk proses amplifikasi, tetapi perlu disambungkan dengan qPCR untuk tujuan kuantifikasi.

QPCR juga dikenali sebagai lebih kuantitatif kerana data dapat dikumpulkan sebagai fasa pertumbuhan eksponen (log) dari PCR yang berlangsung. Para ahli biologi mencatatkan bahawa kuantiti hasil sampingan PCR berkadaran secara langsung dengan jumlah asid nukleik template yang akan diukur melalui qPCR.

Sebaliknya, RT-PCR jauh daripada mempunyai sifat kuantitatif kerana pematuhan keamatan band yang diperkuatkan pada gel berikutan piawaian set kepekatan boleh menyebabkan kesimpulan "separuh kuantitatif".

Ringkasan:

1.QPCR dan RT-PCR adalah kedua-dua istilah yang digunakan dalam bioteknologi dan digunakan untuk menghasilkan pelbagai salinan DNA.
2.RT-PCR digunakan untuk menguatkan transkripsi kod terbalik; QPCR mengukur penguatan.
3.RT-PCR adalah untuk amplifikasi, manakala qPCR adalah untuk kuantifikasi.
4. QPCR adalah sifat kuantitatif, sedangkan RT-PCR tidak.