Marilah kita melihat makna HPLC dan LCMS sebelum menganalisis perbezaan antara HPLC dan LCMS. Kromatografi adalah teknik pemisahan dalam analisis kimia di mana konstituen sampel dipisahkan semasa laluan melalui medium kromatografi. Ia juga melibatkan interaksi dengan sampel, fasa pegun, dan fasa bergerak. HPLC bermaksud Kromatografi Cecair Prestasi Tinggi, dan ia digunakan sebagai kaedah kromatografi cecair dalam kimia analitik. Gabungan Kromatografi Cecair dan Spektroskopi Massa (LCMS) telah dibangunkan untuk analisis kuantitatif biomolekul terpilih dan ia adalah prosedur yang sangat sensitif, tepat dan spesifik berbanding dengan HPLC. Ini adalah perbezaan utama antara HPLC dan LCMC. Artikel ini akan memperkenalkan anda kepada HPLC dan LCMC yang menangani analisis kimia dan membincangkan perbezaan antara HPLC dan LCMS.
Kromatografi cecair prestasi tinggi (HPLC) adalah popular teknik pemisahan dalam kimia analitik. Ia terutamanya digunakan untuk memisahkan komponen, untuk mengenal pasti dan untuk mengukur setiap komponen dalam campuran. Terdahulu, kaedah ini dikenali sebagai kromatografi cecair tekanan tinggi kerana ia bergantung kepada pam untuk mengalir pelarut cecair bertekanan yang terdiri daripada campuran sampel melalui lajur yang penuh dengan bahan penyerap pepejal. Setiap penyusun dalam campuran sampel berinteraksi secara berbeza dengan bahan penyerap pepejal, yang menghasilkan kadar aliran yang berlainan bagi pengadunan yang berlainan. Ini boleh menyebabkan pemisahan komponen apabila mereka mengalirkan lajur HPLC.
HPLC telah digunakan untuk pelbagai aplikasi seperti analisis paras vitamin D dalam darah, penggunaan dadah haram atlet dengan mengesan residu dadah dalam air kencing mereka, menyusun juzuk sampel biologi kompleks untuk tujuan penyelidikan dan analisis dan pembuatan farmaseutikal.
Spektroskopi jisim kromatografi cecair (LCMS) adalah teknik analitik yang menggabungkan kebolehan pemisahan fizikal kromatografi cecair dengan kebolehan analisis massa spektrometri massa (MS). Kromatografi cecair adalah teknik pemisahan, dan spektrometri massa digunakan untuk menganalisis nisbah mass-to-charge zarah yang dikenakan. Pemisahan fizikal biasanya dicapai oleh HPLC dan secara alternatif, LCMS juga dikenali sebagai HPLC-MS. LCMS adalah a teknik analitikal yang dominan yang mempunyai a ketepatan, sensitiviti dan kekhususan yang sangat tinggi berbanding dengan HPLC. Oleh itu, ia berguna dalam banyak aplikasi seperti tujuan penyelidikan, analisis dadah, analisis makanan, dll. LCMS adalah terutamanya digunakan untuk memisahkan, mengesan, mengenalpasti dan mengukur sifat biokimia sampel tertentu dalam kehadiran campuran kimia yang kompleks.
HPLC: HPLC bermaksud Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi. Ia adalah teknik pemisahan yang digunakan terutamanya untuk memisahkan komponen, untuk mengenal pasti dan mengira setiap komponen dalam campuran.
LCMS: LCMS bermaksudKromatografi Cecair dan Spektrometri Massa. Ini adalah teknik analitik yang menggabungkan kebolehan pemisahan fizikal kromatografi cecair dengan kebolehan analisis massa spektrometri massa (MS).
HPLC: Ini adalah kaedah Kromatografi Cecair sahaja.
LCMS: Ini adalah gabungan kaedah Kromatografi Cecair dan kaedah Mass Spectrometry.
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang cekap dan lebih perlahan.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS adalah cekap dan lebih cepat.
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang sensitif.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS lebih sensitif.
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang spesifik.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS lebih spesifik.
HPLC: HPLC memberikan keputusan yang kurang tepat daripada LCMS untuk menentukan beberapa bahan kimia.
LCMS: LCMS memberikan hasil yang lebih tepat daripada HPLC untuk menentukan beberapa bahan kimia.
HPLC: HPLC boleh dianggap sebagai komponen LCMS.
LCMS: LCMS tidak boleh dianggap sebagai komponen HPLC.
HPLC: Sumber ion tidak wujud dalam instrumen HPLC.
LCMS: Sumber Ion terdapat dalam instrumen LCMS.
HPLC: Ion, polimer, molekul organik, dan biomolekul boleh dianalisis menggunakan HPLC.
LCMS: Molekul dan biomolekul organik boleh dianalisis. Berbeza dengan HPLC, LCMS boleh digunakan untuk mengkaji campuran yang tidak lengkap.
HPLC: Gambarajah instrumen HPLC diberikan dalam angka 1, dan ia biasanya termasuk autosampler, pam, dan pengesan. Sampler memperkenalkan campuran sampel ke dalam fasa bergerak (campuran pelarut seperti air, asetonitril dan / atau metanol) yang memindahkannya ke lajur. Pam menyampaikan aliran dan komposisi fasa bergerak yang dikehendaki melalui lajur. Lajur diisi dengan penjerap, iaitu zarah padat kasar seperti silika atau polimer. Pengesan menghasilkan isyarat yang bersesuaian dengan jumlah sampel penyusun konstituen dalam lajur, oleh itu membenarkan analisis kuantitatif bagi sampel-sampel sampel yang dipilih. Instrumen HPLC dikawal, dan analisis data disediakan oleh mikropemproses digital dan perisian pengguna.
Rajah 1: Gambarajah instrumen HPLC
LCMS: Gambarajah instrumen LCMS diberikan dalam gambar 2. Sampel sampel dimasukkan ke dalam lajur yang terdiri daripada HPLC. Lajur ini mengekalkan metabolit sampel berdasarkan karakter fizikal, dan metabolit yang berbeza mengalir ke spektrometer massa pada selang waktu yang berlainan. Spektroskopi massa digunakan untuk menilai massa zarah, untuk menentukan susunan unsur molekul, dan untuk menjelaskan struktur molekul. Walau bagaimanapun, sampel harus diionisasikan untuk menjana molekul terapung untuk menentukan nisbah mass-to-charge mereka. Oleh itu, bukannya instrumen HPLC, LCMS merangkumi tiga modul tambahan seperti sumber besi, penganalisis massa, dan pengesan. Sumber ion boleh mengubah sampel fasa gas ke dalam ion dan penganalisis massa mengelompokkan ion oleh massa mereka menggunakan medan elektromagnet. Akhir sekali, pengesan mengira nilai-nilai dan menyampaikan data setiap ion yang hadir dalam sampel. Teknik LCMS boleh digunakan untuk kedua-dua aplikasi kualitatif dan kuantitatif.
Rajah 2: Gambarajah instrumen LCMS
Kesimpulannya, HPLC adalah kaedah kromatografi cair manakala LCMS adalah gabungan kromatografi cair dan spektrometri massa. Kedua-dua teknik analisis ini mempunyai ciri-ciri yang berbeza, tetapi ia boleh digunakan untuk mengenal pasti dan mengukur komposisi makanan, farmaseutikal, dan molekul bioaktif lain.
Rujukan Arpino, P. (1992). Spektrometri massa kromatografi cecair gabungan. Bahagian III. Aplikasi termospray. Kajian Spektrometri Massa, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. dan Spoendlin, C. (2004). Aspek praktikal kromatografi cecair prestasi tinggi yang terbalik fasa terbalik dengan menggunakan lajur 3μm yang dibungkus zarah dan lajur monolitik dalam pembangunan farmaseutikal dan pengeluaran yang bekerja di bawah amalan pengilangan yang baik semasa. Jurnal Kromatografi, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. dan Kerns, E. H. (1999). Aplikasi LC / MS dalam pembangunan dadah. Kajian Spektrometri Massa, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Gandingan laser yang dibantu oleh desorpsi / pengionan kepada pemisahan cecair. Kajian Spektrometri Massa 16 (5): 283. Image Courtesy: "Hplc" oleh pemuat naik asal adalah Kjaergaard di en.wikipedia - Dipindah dari en.wikipedia. (Domain Awam) melalui Commons