Perbezaan Antara HPLC dan UPLC

The perbezaan utama antara HPLC dan UPLC adalah bahawa HPLC membolehkan analisis zarah-zarah yang mempunyai saiznya sekitar 5 mikrometer manakala UPLC membolehkan zarah-zarah yang lebih kecil sekitar 2 mikrometer.

HPLC dan UPLC adalah kedua-dua teknik kromatografi cecair yang berguna untuk memisahkan komponen sebatian. Untuk mengetahui perbezaan antara HPLC dan UPLC, kita perlu tahu apa HPLC. Ini kerana UPLC adalah versi khas HPLC dan kami dapat dengan mudah memahaminya jika kita tahu apa HPLC itu.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah HPLC
3. Apakah UPLC
4. Side by Side Comparison - HPLC vs UPLC dalam Borang Tabular
5. Ringkasan

Apakah HPLC??

Istilah HPLC bermaksud Prestasi Tinggi Kromatografi Cecair. Ia adalah satu teknik yang boleh kita gunakan untuk memisahkan unsur-unsur yang berbeza dari sebatian. Juga, ia adalah teknik yang paling banyak digunakan untuk mengenal pasti, mengira dan memisahkan komponen campuran. Selain itu, teknik ini menggunakan tekanan tinggi untuk mendorong pelarut melalui lajur. Tambahan pula, aplikasi utama HPLC adalah dalam biokimia untuk analisis konstituen sebatian. Ia adalah cara yang ideal untuk pemisahan dan pengenalpastian asid amino, asid nukleat, protein, hidrokarbon, racun perosak, karbohidrat, antibiotik, steroid dan bahan bukan organik lain yang tidak terkira banyaknya.

Rajah 01: Sistem HPLC dalam Makmal

Ringkasnya, kaedah pengendalian teknik HPLC adalah seperti berikut. Pertama, kita perlu memperkenalkan sampel ke dalam aliran fasa mudah alih dalam jumlah kecil diskret menggunakan pam. Tekanan pam perlu dikekalkan pada 40 MPa. Kemudian, arus fasa mudah alih ini menyerap melalui lajur HPLC. Juga, komponen dalam sampel melepasi lajur. Walau bagaimanapun, kelajuan pergerakan mereka berbeza antara satu sama lain. Perbezaan ini timbul kerana perbezaan dalam interaksi antara komponen sampel dan penjerap di dalam lajur. Kami menyebut penjerap ini sebagai fasa pegun kerana ia berada di dalam lajur (tidak bergerak). Kedua, pada akhir lajur, kita boleh mengumpul sampel yang elutes dari lajur. Di sana kita dapat menentukan perbezaan dalam masa penyimpanan untuk setiap komponen dalam sampel.

Apa itu UPLC?

Istilah UPLC bermaksud Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi Ultra. Ini adalah variasi HPLC, tetapi kaedah operasi adalah sama. Walau bagaimanapun, tidak seperti HPLC, kaedah ini membolehkan zarah-zarah yang sangat kecil untuk dianalisis, seperti 2 mikrometer zarah kecil.

Rajah 02: Peranti UPLC

Selain itu, ia menyediakan analisis yang lebih cepat. Dalam teknik ini, kita menggunakan tekanan pam 100 MPa untuk memasukkan sampel ke dalam lajur. Oleh itu, tekanan tinggi ini mengesahkan bahawa keseluruhan sampel dimasukkan ke dalam lajur. Oleh itu, ini sangat berkesan berbanding HPLC.

Apakah Perbezaan Antara HPLC dan UPLC?

Istilah HPLC bermaksud Kromatografi Liquid Kinerja Tinggi manakala istilah UPLC bermaksud Ultra Kromatografi Liquid Kinerja Tinggi. Oleh itu, teknik UPLC adalah versi HPLC yang dibangunkan. Oleh itu, kaedah operasi adalah sama untuk kedua-dua teknik. Walau bagaimanapun, UPLC adalah lebih cekap berbanding dengan HPLC kerana ia menggunakan tekanan pam yang tinggi; Tekanan pam HPLC ialah 40 MPA manakala 100 MPa untuk UPLC. Oleh itu, ini adalah perbezaan antara HPLC dan UPLC. Di atas semua, perbezaan utama antara HPLC dan UPLC ialah HPLC membenarkan analisis zarah-zarah yang mempunyai saiznya sekitar 5 mikrometer manakala UPLC membolehkan zarah-zarah yang lebih kecil sekitar 2 mikrometer.

Ringkasan - HPLC vs UPLC

UPLC adalah satu bentuk HPLC. Oleh itu, kaedah operasi adalah sama. Tetapi, kita boleh menemui beberapa ciri yang lebih baik di UPLC berbanding dengan HPLC. Oleh itu, terdapat beberapa perbezaan antara HPLC dan UPLC. Walau bagaimanapun, perbezaan utama antara HPLC dan UPLC ialah HPLC membenarkan analisis zarah-zarah yang mempunyai saiznya sekitar 5 mikrometer manakala UPLC membolehkan zarah-zarah yang lebih kecil sekitar 2 mikrometer.

Rujukan:

1. "Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 20 Okt. 2018. Boleh didapati di sini
2. "UPLC." Wikipedia, Yayasan Wikimedia, 25 Okt. 2017. Boleh didapati di sini  

Image Courtesy:

1. "Hplc" Oleh Kjaergaard di Wikipedia Bahasa Inggeris (Public Domain) melalui Wikimedia Commons 
2. "Gambar peranti UPLC" oleh Groep29 BFW - Kerja sendiri, (Domain Awam) melalui Wikimedia Commons